[发明专利]一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法

说明书

本发明提供了一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，涉及药物分析技术领域。本发明提供了一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，包括如下步骤：(1)配制S‑阿福拉纳对照品溶液和R‑阿福拉纳对照品溶液；(2)配制阿福拉纳供试品溶液；(3)配制阿福拉纳系统适用性溶液；(4)用正相高效液相色谱仪对对照品溶液、供试品和系统适用性溶液进行检测，所述正相高效液相色谱的检测条件为：色谱柱：Daicel CHIRALPAK IA‑3 4.6×250mm,3μm。本发明提供了一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，通过特定的色谱柱和流动相的选择，可以实现阿福拉纳手性异构体的有效分离与准确测定。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，尤其是一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法。

背景技术

随着经济快速发展，据统计，中国城镇养宠用户已达到6294万人，其中养犬人数约3,593万，然而宠物极易感染寄生虫病，其中常见的外寄生虫有蜱虫、跳蚤等，不仅影响宠物的健康和发育，还会对人体甚至环境带来隐患。

阿福拉纳(Afoxolaner)属于新型的异噁唑啉类药物，对蜱虫和跳蚤有较强的药理作用和杀虫活性，其主要对特定的GABA受体起抑制作用，阻断氯离子从突触前膜到突触后膜的传递，具体表现为过度兴奋，惊厥死亡等。阿福拉纳存在一对手性异构体，是由两种单一手性异构体S和R型组成的对映体。其中S-阿福拉纳和R-阿福拉纳的结构式如下：

上市的阿福拉纳制剂成分均为S和R构型的混合物，而R构型异构体并没有杀虫剂的治疗活性。将二者进行有效分离，成为阿福拉纳分离纯化以及质量控制中的重点和难点。目前，尚未发现分离阿福拉纳手性异构体的检测方法的相关专利及文献报道，随着国内对该产品的深入研究，建立一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法是非常必要的，为后续开发S异构体原料药和制剂，并且检查R异构体提供了保证。

发明内容

基于此，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种既简便又快速的阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，从而实现S-阿福拉纳与R-阿福拉纳的有效分离与准确测定。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，包括如下步骤：

(1)配制S-阿福拉纳对照品溶液和R-阿福拉纳对照品溶液；

(2)配制阿福拉纳供试品溶液；

(3)配制阿福拉纳系统适用性溶液；

(4)用正相高效液相色谱仪对对照品溶液、供试品和系统适用性溶液进行检测，所述正相高效液相色谱的检测条件为：色谱柱：Daicel CHIRALPAK IA-34.6×250mm,3μm。

本发明提供了一种阿福拉纳手性异构体的分离检测方法，通过特定的色谱柱的选择，可以实现阿福拉纳手性异构体的有效分离与准确测定。

优选地，所述步骤(4)正相高效液相色谱的检测条件中，流动相A为正己烷、正庚烷中的至少一种，流动相B为乙醇、异丙醇中的至少一种。

优选地，所述步骤(4)正相高效液相色谱的检测条件中，流动相A和流动相B的体积比为：流动相A：流动相B＝60～75：25～40。发明人经过大量实验探究后发现，正相高效液相色谱流动相的选择对阿福拉纳手性异构体的分离检测有重要影响，当正相高效液相色谱流动相采用上述选择时，理论塔板数不小于2000，分离度大于1.5，阿福拉纳手性异构体之间能够实现很好的分离。

进一步优选地，所述步骤(4)正相高效液相色谱的检测条件中，流动相A和流动相B的体积比为：流动相A：流动相B＝65：35。发明人经过大量实验探究后发现，当正相高效液相色谱流动相采用上述选择时，分离度更高，阿福拉纳手性异构体之间能够更好的分离。