[发明专利]一种改良的丝素蛋白基水凝胶支架、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种改良的丝素蛋白基水凝胶支架的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

A. 从蚕茧中提取丝素蛋白原液；

B. 丝素蛋白微球制取：

（1）将药物溶于丝素蛋白溶液中，搅拌均匀后，匀速滴加到含 Span-80 的石蜡中，滴加完后继续恒温恒速下搅拌，而后匀速滴加戊二醛使材料固化成球，而后将含微球的混合相离心，取上层油相混微球层，加入无水乙醇进行离心，弃液体，得到成型微球，微球洗涤后经真空冷冻干燥备用；

（2）将步骤（1）提取的丝素蛋白原液稀释成3%的丝素蛋白溶液，将药物加入到3%丝素蛋白溶液中,配制成的含有药物的3%的丝素蛋白溶液, 超声处理30s, 形成含有药物的丝素蛋白前体溶液,与此同时,将含有药物的微球加入到含有药物的丝素蛋白前体溶液中，紫外灭菌，37^oC温箱中静置凝胶，获得丝素蛋白基水凝胶支架。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A中丝素蛋白原液的提取，是通过将蚕茧碎片在Na₂CO₃溶液中煮沸获得丝素，经洗涤干燥后，再加入适量LiBr溶液，获得丝素蛋白溴化锂溶液，纯水透析，离心去除杂质，获得丝素蛋白原液。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，丝素蛋白原液的浓度可根据如下方法确定：

取100μl的溶液滴在铝箔上，并使其在60^oC下干燥，称量干燥后的重量，将铝箔重量记为Wo；滴有丝素蛋白溶液的铝箔重量记为W1；干燥后的铝箔重量记为W2；

丝素蛋白浓度=【（ W2-Wo）/（W1-Wo）】/100μl , 浓度单位：g/μl。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤A中，将制备的丝素蛋白原液用去离子水稀释为浓度为5%的丝素蛋白溶液用于步骤2。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤B（1）中，成型微球经洗涤并离心九次后备用，前六次用无水乙醇，最后三次用 PBS。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤B（1）中，Span-80和液体石蜡的体积比为1：10, 戊二醛和丝素蛋白溶液的体积比为5:1。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤B（2）中，含有药物的微球与含有药物的丝素蛋白前体溶液体积比为1:10。

8.一种根据权利要求1-7任一所述的制备方法制备获得的丝素蛋白基水凝胶支架，其特征在于，该支架具有增强的机械性能和时序性释放药物的性能。

9.一种根据权利要求1-7任一所述的制备方法或根据权利要求8所述的丝素蛋白基水凝胶支架在制备治疗牙科疾病的药物或材料中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述牙科疾病包括恒牙根尖周病。