[发明专利]一种改良的丝素蛋白基水凝胶支架、制备方法及其应用

说明书

本发明提供一种改良的丝素蛋白基水凝胶支架，该支架通过微球嵌入到水凝胶多孔结构中，增加了支架的机械性能，防止了MTA的塌陷，并且该支架可利用不同结构丝素蛋白降解速度的不同来控制不同药物的释放，以此来达到不同时间段各药物的作用。具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物材料领域，更为具体地，本发明涉及改良的丝素蛋白水凝胶支架的制备方法及其应用。

背景技术

年轻恒牙根尖周病一直是临床治疗的难点。牙髓血运重建术是近年来年轻恒牙根尖周病治疗的新方法，通过根管冲洗消毒，避免机械预备，通过针刺引导根尖部血液充溢于根管并诱导根尖干细胞进行增殖分化，以此来达到根管内血管样组织的形成，促进牙根继续发育，取得较好的临床疗效。

牙髓血运重建术具体操作步骤如下：

1、根管消毒：橡皮障隔离患牙，常规被动开髓，次氯酸钠与生理盐水交替冲洗，彻底去除根管内感染物。干燥根管后，导入三联抗菌糊剂，玻璃离子暂封。

2、根管消毒两周后，局麻下，去除暂封材料，次氯酸钠、17%EDTA和生理盐水交替冲洗根管内残留坏死牙髓及抗菌糊剂，干燥根管，口腔显微镜下，15号K挫针刺根尖部出血，静待15分钟后血凝块形成，血凝块上放置MTA，氧化锌丁香油暂封闭开髓口。

一周后去除暂封物，探及MTA硬固后，复合树脂永久性充填。

然而在临床实际应用时，存在如下技术弊端：

1、MTA使用过程中容易发生塌陷，因血凝块机械性能不足，可造成血凝块的破坏作用；

2、血凝块不成形：由于根尖部长期炎症的破坏，根尖部组织受到影响；

3、根管残留菌无法去除干净，细菌的残留会致使血凝块不形成、干细胞生长受限以及根管的再次感染；

根管牙本质中保留的生长因子含量较少，促进干细胞增殖、分化的能力有限。

因此，迫切需要对该技术和所用材料进行改良，使之能获得更好的治疗效果。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提供一种具有较好机械性能并能够控制不同药物释放速度的丝素蛋白基水凝胶支架、制备方法及其应用。具体的，本发明提供如下的技术方案：

本发明的第一个方面，提供一种改良的丝素蛋白基水凝胶支架的制备方法，所述方法包括如下步骤：

A、从蚕茧中提取丝素蛋白原液；

B、丝素蛋白微球制取：

（1）将药物溶于丝素蛋白溶液中，搅拌均匀后，匀速滴加到含 Span-80 的石蜡（油相）中，滴加完后继续恒温恒速下搅拌，而后匀速滴加戊二醛使材料固化成球，而后将含微球的混合相离心，取上层油相混微球层，加入无水乙醇进行离心，弃液体，得到成型微球，微球洗涤后经真空冷冻干燥备用；

（2）将步骤（1）提取的丝素蛋白原液稀释成3%的丝素蛋白溶液，将药物加入到3%丝素蛋白溶液中,配制成的含有药物的3%的丝素蛋白溶液, 超声处理30s, 形成含有药物的丝素蛋白前体溶液,与此同时,将含有药物的微球加入到含有药物的丝素蛋白前体溶液中，紫外灭菌，37^oC温箱中静置凝胶，获得丝素蛋白基水凝胶支架。

在一种实施方式中，上述制备方法中步骤A中丝素蛋白原液的提取，是通过将蚕茧碎片在Na₂CO₃溶液中煮沸获得丝素，经洗涤干燥后，再加入适量LiBr溶液，获得丝素蛋白溴化锂溶液，纯水透析，离心去除杂质，获得丝素蛋白原液。

在一种实施方式中，丝素蛋白原液的浓度可根据如下方法确定：