[发明专利]超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱检测酒醅中果胶的方法

说明书

本发明公开了一种超高效液相色谱‑四级杆静电场轨道阱检测酒醅中果胶的方法，属于检测技术领域。本发明利用果胶酶对酒醅进行酶解处理，使果胶分解为半乳糖醛酸，然后测定半乳糖醛酸的含量，半乳糖醛酸的含量可以用于间接计算果胶的含量。本发明提供的检测半乳糖醛酸含量的方法灵敏度高、稳定性好、抗基质干扰能强。

技术领域

本发明涉及一种检测酒醅中半乳糖醛酸含量的方法，尤其是利用超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱检测酒醅中半乳糖醛酸的方法，属于检测技术领域。

背景技术

果胶是一种存在于植物细胞壁和细胞内层的亲水性多糖，常与植物体内的纤维素结合在一起，是植物细胞和骨架的主要构成部分。勇强等人降解商品果胶发现半乳糖醛酸含量在果胶中占比为62.10％，可见果胶的主要成分是由D-半乳糖醛酸相连形成的高分子化合物，其中大部分羧基已形成甲基酯，可在一定条件下水解脱甲基形成甲醇，因此果胶含量与甲醇含量呈直接关系。

在传统固态发酵白酒的酿造工艺中，高粱经过清洗、蒸煮糊化，摊开凉了加曲进行糖化，再入窖内进行发酵，发酵完成后被称为酒醅。在农业标准NY/T 2016-2011中规定水果及其制品中果胶含量的测定方法为分光光度法，但酒醅中富含有机酸、糖、氨基酸、色素等各类化学成分，基质较为复杂，分光光度法难以实现酒醅复杂基质中果胶的测定。

果胶含量的测定方法主要有化学分析法和仪器分析法，化学方法包括：盐酸-乙醇沉淀法、滴定法、重量法，仪器分析方法主要为比色法。但由于化学分析法分析精度不高，比色法受测定样品的基质干扰严重，尚没有一种成熟的方法用于酒醅中果胶含量的测定。另外，由于果胶的分子量介于10～400kDa之间，结构复杂，分子量大，溶解性差，因此直接测定果胶含量难以实现。通常是将果胶分解成半乳糖醛酸，然后通过测定半乳糖醛酸的含量间接得到果胶含量，然而，基于酒醅复杂的成分，半乳糖醛酸也很难测定。

发明内容

[技术问题]

本发明要解决的技术问题是现有检测果胶、半乳糖醛酸的方法不适用于酒醅。

[技术方案]

本发明利用果胶酶对酒醅进行酶解处理，使果胶分解为半乳糖醛酸，然后测定半乳糖醛酸的含量，半乳糖醛酸的含量可以用于间接计算果胶的含量。本发明提供的检测半乳糖醛酸含量的方法灵敏度高、稳定性好、抗基质干扰能强。

本发明提供一种检测酒醅中半乳糖醛酸的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)称量酒醅样品；

(2)加入果胶酶

向每克酒醅中加入25～100mg果胶酶；

(3)加水稀释

向每克酒醅中加入50～250mL的pH 2～6的盐酸溶液；

(4)匀浆

将步骤(3)所得混合物在4000r/min条件下均质2min；

(5)提取

将步骤(4)均质得到的混合物于超声波400W条件下处理30～100min；

(6)离心

取步骤(4)得到的混合液1mL以12000r/min离心10min；

(7)乙腈稀释；

取步骤(6)得到的上清液用乙腈稀释4倍；

(8)二次离心；

取步骤(7)得到的稀释液以12000r/min离心10min；

(9)过滤