[发明专利]基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法与装置在审
申请号: | 202210291759.4 | 申请日: | 2022-03-23 |
公开(公告)号: | CN114705867A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 应迪清;李璐;唐超;田永强 | 申请(专利权)人: | 浙江大学;杭州领昕生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/577;G01N21/64 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 郑海峰 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 调制 解调 技术 胎盘 生长因子 免疫 荧光 层析 测定 方法 装置 | ||
1.一种基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:利用层析试纸卡测试胎盘生长因子样品,在层析试纸卡的测试线处截获带荧光标记物的胎盘生长因子免疫复合物,形成双抗体夹心复合物;
步骤2:控制激光器以一定的受到调制的波长照射层析试纸卡的测试线,双抗体夹心复合物中的荧光标记物因受激光激发而发射荧光;
步骤3:对荧光进行会聚、滤波后转化为表征荧光标记物浓度的电信号,对电信号进行解调,得到表征胎盘生长因子水平的解调信号。
2.根据权利要求1所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,步骤1所述的胎盘生长因子提取自胎盘组织。
3.根据权利要求1所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述的层析试纸卡由层析试纸条、用于固定层析试纸条的塑料底板和用于封装的塑料外壳构成;所述的层析试纸条包括样品垫、结合垫、测试线、质控线和吸水纸,所述的样品垫用于吸收胎盘生长因子样本;所述的结合垫上吸附有标记荧光物质的胎盘生长因子单克隆抗体;所述的测试线包被有胎盘生长因子单克隆抗体,用于截获带荧光标记物的胎盘生长因子免疫复合物,以形成双抗体夹心复合物;所述的质控线包被有胎盘生长因子多克隆抗体,用于截获带荧光标记物的胎盘生长因子单克隆抗体;所述的吸水纸用于促进样品溶液的侧向流动。
4.根据权利要求1所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述激光器的最佳波长工作点选择方法为:
将胎盘生长因子标准液滴加在层析试纸卡的样品垫上,并静止放置10-15分钟,使得样品得到充分层析;
待层析充分后,在激光器波长受到高频调制的同时随时间线性调节激光器的工作波长,从而线性扫描在不同工作波长条件下的解调信号,记录工作波长与解调信号之间的关系曲线;
根据所述关系曲线,得到最大解调信号对应的工作波长,该工作波长即为选取得到的最佳波长工作点。
5.根据权利要求1所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述的调制信号为方波或正弦波。
6.根据权利要求1所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述步骤3在解调时,获取与表征荧光标记物浓度的电信号同步的参考信号,根据参考信号计算解调信号。
7.根据权利要求6所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述调制信号为方波时,解调信号表示为:
其中,D为方波解调信号,Ts为方波波长调制周期,fs为方波波长调制频率,n为正整数,Pq为表征荧光标记物浓度的方波电信号,Sr为方波参考信号,t为时间,Aq为方波参考信号幅值。
8.根据权利要求6所述的基于调制解调技术的胎盘生长因子免疫荧光层析测定方法,其特征在于,所述调制信号为正弦波时,在解调过程中首先将表征荧光标记物浓度的正弦波电信号与正弦波参考信号相乘:
其中,S为解调的中间结果,P为表征荧光标记物浓度的正弦波电信号,为正弦波参考信号,A为正弦波参考信号幅值,f为正弦波参考信号频率,为正弦波参考信号初始相位;
之后,将信号S进行低通滤波处理,得到解调信号。
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