[发明专利]一种酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法

权利要求书

1.一种酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：由以下步骤组成：

（1）将右旋糖酐蔗糖酶基因和表达载体pET28a(+)相连接，并将连接产物转化至大肠杆菌BL21，获得包含右旋糖苷酶的重组菌株；

（2）将重组载体进行扩大培养，诱导菌株进行右旋糖酐蔗糖酶的表达；

（3）对含重组菌株的菌液进行高压匀浆破碎，离心后获得含右旋糖酐蔗糖酶的酶液；

（4）酶活通过测定蔗糖转化过程中果糖的释放来确定；

（5）将步骤（3）得到的酶液与蔗糖按比例混合反应；

（6）向步骤（5）中反应液加入95%乙醇，离心后得到不溶葡聚糖；

（7）将步骤（6）得到的不溶葡聚糖放入冻干机冻干，得到纯的不溶葡聚糖产品；

（8）将步骤（7）中的葡聚糖与PEI进行混合得到修饰后的不溶葡聚糖。

2.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：所述右旋糖酐蔗糖酶基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

3.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：步骤（2）中所述的感受态细胞BL21扩大培养所用的培养基为LB培养基。

4.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的离心条件为8000r，10min，4℃。

5.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：步骤（5）中所述的酶的添加量为10U/ml，蔗糖添加量为100g/L。

6.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：步骤（6）中所述的离心条件为8000r，10min。

7.根据权利要求1所述的酶法制备不溶葡聚糖并进行化学修饰的方法，其特征在于：步骤（8）中所述的反应条件聚乙烯亚胺：葡聚糖=10mg/mL：10mg/mL，反应时间24h。