[发明专利]一种核酸质谱盐离子干扰评价方法在审
申请号: | 202210306742.1 | 申请日: | 2022-03-25 |
公开(公告)号: | CN114755289A | 公开(公告)日: | 2022-07-15 |
发明(设计)人: | 何芬;相双红;叶圣军;李璇 | 申请(专利权)人: | 浙江迪谱诊断技术有限公司 |
主分类号: | G01N27/626 | 分类号: | G01N27/626;C12Q1/686 |
代理公司: | 北京乐知新创知识产权代理事务所(普通合伙) 11734 | 代理人: | 黄梅 |
地址: | 311100 浙江省杭州市余*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 质谱盐 离子 干扰 评价 方法 | ||
1.一种核酸质谱盐离子干扰评价方法,其特征在于,该方法包括:
根据核酸质谱图识别PCR反应产物中盐离子加合峰,所述盐离子加合峰为PCR反应中盐离子产生的加合物形成的质谱峰;
根据所述盐离子加合峰的峰型特征和分布特征对所述盐离子进行干扰评价,所述干扰评价包括盐离子纯化程度、盐离子影响量或/和补偿量、预期纯化剂更换时间中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述盐离子加合峰位于核酸质谱图中目标峰的位置处或目标峰的右侧,所述目标峰为PCR反应中目标对象形成的质谱峰,所述目标对象为核酸样本的延伸引物或/和延伸产物。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述目标对象包含但不限于核酸样本的延伸引物、核酸样本的腺嘌呤A型延伸产物、核酸样本的鸟嘌呤G型延伸产物、核酸样本的胞嘧啶C型延伸产物、核酸样本的胸腺嘧啶T型延伸产物、核酸样本尿嘧啶的U型延伸产物中的一种或多种。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于,在PCR反应中,所述目标对象与所述盐离子反应生成加合物,所述加合物的分子量为所述目标对象的分子量与所述盐离子的分子量之和。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述盐离子加合峰的峰型特征包括分子量、峰高、峰面积、信噪比、分辨率中的一种或多种。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述盐离子加合峰包括独立加合峰和重叠加合峰;
若所述盐离子加合峰的分子量与所述目标峰的分子量的差值与盐离子的分子量相同,则所述盐离子加合峰为独立加合峰;
若核酸质谱图中存在独立加合峰且所述目标峰之间的分子量的差值与盐离子的分子量相同,则分子量较大的所述目标峰中存在重叠加合峰。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,对所述盐离子进行盐离子纯化程度评价,包括:
将独立加合峰的峰高或峰面积与其对应的目标峰的峰高或峰面积的比值确定为加合比,所述加合比为0-1之间的小数;
根据所述加合比对所述盐离子纯化程度进行评价。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述对所述盐离子影响量或/和补偿量进行评价,包括:
若所述目标峰的右侧出现独立加合峰,则独立加合峰与其对应的目标峰的加合比为盐离子影响量;所述独立加合峰的峰高或峰面积为盐离子补偿量;
若所述目标峰的位置处出现重叠加合峰,则根据所述加合比与所述目标峰位置的总峰面积确定盐离子的影响量;所述目标峰位置处的总峰面积与所述目标峰的面积之差为盐离子补偿量。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,对所述预期纯化剂更换时间进行评价,包括:
若所述目标峰的右侧出现盐离子加合峰,当所述盐离子加合峰的峰面积逐渐增大、峰高逐渐变高且所述盐离子加合峰与其对应的所述目标峰的加合比大于等于纯化阈值线时,则预测可更换纯化剂。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,该方法还包括对PCR反应产物中盐离子的纯化进行评价,所述盐离子的纯化评价包括加合比、峰高、峰面积、信噪比、分辨率中的一种或多种。
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