[发明专利]抗IL-33人源化抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种抗人IL‑33抗体或其抗原结合片段，包括重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，所述VH包括抗原决定区VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VL包括抗原决定区VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3。本发明的人源化抗IL‑33抗体来自杂交瘤，可以高亲和力地结合人IL‑33，阻断IL‑33与ST2结合，抑制IL‑33对KU812细胞IL5表达的促进作用，为IL‑33相关疾病的治疗提供了候选抗体分子。

技术领域

本发明涉及生物药物领域。具体而言，本发明涉及一种新型的经人工设计的抗体，特别是IL-33人源化抗体或抗原结合片段。本发明还涉及这些结合IL-33的抗体的治疗和诊断用途，特别是在治疗、预防和/或诊断IL-33相关疾病，例如炎症中的用途。

背景技术

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应。就是平时人们所说的“发炎”，是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛。血管反应是炎症过程的中心环节。通常情况下，炎症是有益的，是人体的自动的防御反应，但是有的时候，炎症也是有害的，例如对人体自身组织的攻击、发生在透明组织的炎症等等。

白细胞介素33（interleukin-33，IL-33）是在2005年发现的一个多功能基因，是炎症反应和免疫偏倚的重要调节因子之一，可作为核内定位的分子发挥转录因子的作用，又可被分泌到胞外起到细胞因子的作用。IL-33是IL-1家族的新成员，受体为ST2（Interleukin 1 like receptor），研究认为，IL-33是在上皮细胞受到损伤之后释放，具有多种功能，包括刺激上皮细胞的重组和促进炎症的发生。IL-33/ST2信号通路是哮喘、特发性皮炎、COPD和慢性阻碍性肺病、慢性鼻窦炎和风湿性关节炎等疾病治疗的潜在靶点。目前有多个针对IL-33和ST2的项目处于临床研究阶段。包括Anaptysbio的etokimab，赛诺菲的SAR-440340，MedImmune的MEDI-3506等。

随着IL-33对炎性疾病发生发展的作用机理日渐清晰，治疗性抗人IL-33抗体吸引了越来越多的关注。目前临床试验进展最快的是赛诺菲和再生元开发的全人源抗IL-33单抗SAR-440340，然而其在哮喘、特异性皮炎、慢性阻塞性肺炎等的临床应用前景方面仍不明朗，此前曾与达必妥联用治疗哮喘，但Ⅱ期临床试验效果不佳。由此，抗IL-33抗体有待进一步研究。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中，IL-33抗体存在与人IL-33受体亲和力不稳定的问题，具体来说，解决IL-33抗体结合活性的技术问题。为此，本发明的一个目的在于制备亲和力更高的IL-33抗体或抗原结合片段。

因而，根据本发明实施例的一个方面，提供了一种抗人IL-33抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包括重链可变区（VH）和轻链可变区（VL），其中，所述VH包括抗原决定区VH CDR1、VH CDR2和VH CDR3，所述VH CDR1包含如SEQ ID NO：14所示的氨基酸序列，所述VH CDR2包含如EIFPGTGTTYYNX₁KFX₂G所示的氨基酸序列，所述VH CDR3包含如SEQID NO：16所示的氨基酸序列；所述VL包括抗原决定区VL CDR1、VL CDR2和VL CDR3，所述VLCDR1包含如X₃ASSSVSYMH所示的氨基酸序列，所述VL CDR2包含如RTSNLX₄S所示的氨基酸序列，所述VL CDR3包含如SEQ ID NO：13所示的氨基酸序列；其中，X1为E或Q；X2为K或Q；X3为S或R；X4位A或Q。

根据本发明实施例的IL-33抗体或抗原结合片段，本发明所得抗体可以与人IL-33结合，且结合人IL-33活性优于对照抗体。其中25D8分子的嵌合抗体ch25D8抑制ST2结合IL-33的活性，明显优于对照抗体，同时其人源化抗体在体外细胞学活性的检测中，也显示出对IL-33的抑制活性优于对照抗体，具有强亲和力。