[发明专利]捕蝇草组培快速育苗方法及应用

说明书

本发明涉及食虫植物培养技术领域，具体是一种捕蝇草组培育苗方法及应用，步骤包括：外植体的消毒；丛生芽的诱导；丛生芽的增殖；丛生芽的生根。本发明在捕蝇草增殖培养时，在培养初期进行高温无光培养，有利于从叶片快速诱导出大量丛生芽，在中期降低温度至适温，继续无光培养，可使丛生芽叶片迅速展开，从而增加增殖系数，而在后期进行适温，光暗交替培养，使丛生苗能更加健壮，一方面提高了可利用叶片数量，另一方面有利于生根时苗的健壮。

技术领域

本发明涉及食虫植物培养技术领域，具体是一种捕蝇草组培快速育苗方法及应用。

背景技术

捕蝇草(Dionaea muscipula)又名苍蝇夹，苍蝇的地狱等，为茅膏菜科捕蝇草属多年生草本植物，亦是捕蝇草属唯一的种，原产于美国南卡罗莱纳州东北部、北卡罗莱纳州东南部以及新泽西州和弗吉尼亚州等地，主要生长于半稀树草原的沼泽、湿地周围，该环境下土质多为泥炭土及硅砂。捕蝇草为最有趣味性的食虫植物，其叶片进化为夹子状捕虫器，可通过释放挥发性有机化合物吸引昆虫，当猎物爬过时多次触碰到夹子内的小刺，夹子即可产生动作电位并迅速关闭夹子，同时，昆虫在夹子内反复摆动，促使夹子分泌消化液，最终“吃”掉昆虫。早在1875年，达尔文便在其专著《Insectivorous Plants》中描述了捕蝇草的捕食现象,并称之为世界上最奇妙的植物。

随着科技的进步，对捕蝇草的研究不仅限于其观赏性及趣味性，21世纪，各国科学家研究了其捕虫机理，根据仿生学发明了捕蝇草仿生机器人、人工肌肉仿生结构的机翼、可编程复合材料、光驱动人工捕蝇器、基于吸湿电纺纳米纤维的双稳态软激发结构等。同时，捕蝇草内次生代谢产物白花丹醌及其衍生物、香草酸、槲皮素等的分离提纯，捕蝇草的药用价值也在逐步开发。

根据捕蝇草叶片、夹子等形态，将捕蝇草分别命名为大嘴、三头犬、蜘蛛、花市、鲨鱼等百余品系，由于其独特的观赏性和趣味性，捕蝇草被世界各国引种栽培。21世纪初，我国逐步开始引进捕蝇草的种植，目前主要集中于浙江、广东、北京、山东、云南、四川等省市栽培。

最初我国引种时捕蝇草主要以叶片进行扦插繁殖获得种苗，栽植一段时间后开始结籽，种子繁殖亦成为捕蝇草种苗的繁殖方法，但经过年多次的种子繁殖研究，种子繁殖极易出现“返祖”的情况，因此，后期在捕蝇草市场化栽培中，叶插还是作为捕蝇草种苗的主要繁殖方式。

随着科技的进步，利用现代生物组培技术，亦成为捕蝇草种苗来源的重要方式，但捕蝇草种类极多，且更新较快，捕蝇草需不停的进行新品种的组培初代诱导，而捕蝇草组培初代诱导时，在消毒环节极其难，一般单品种开展时，需经过一年甚至更长周期的初代培养。同时，现有捕蝇草组培技术还存在培养过程中叶片色泽变红，培养周期长，苗培养过程中极易产生僵苗等情况。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，发明了一种消毒污染率及消毒死亡率低、培养周期短、苗健壮、不会出现僵苗的捕蝇草组培繁育方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种捕蝇草组培快速育苗方法，步骤包括：

1.外植体清洁：选取健康无病虫害的捕蝇草叶片作为外植体，用软毛刷蘸取饱和肥皂液反复轻刷叶片表面6～8次，并用自来水洗净表面肥皂液，后滴加2～3滴吐温-80，浸泡30～40min，再用自来水冲淋60～70min；

2.外植体消毒：洗净的外植体转移至超净工作台，依次用75％(v/v)酒精消毒10～15s，无菌水涮洗2～3次，4％双氧水溶液消毒6～7min，无菌水涮洗2～3次，后在超声波清洗机中，将超声波调至25～30kHz，用0.4％新洁尔灭溶液超声消毒2～3min，用无菌水涮洗3～4次，后继续在超声波清洗机中用0.02％升汞溶液超声消毒1～2min，无菌水涮洗6～8次；