[发明专利]胞苷羟化酶及其基因、用途和新冠口服药Molnupiravir的合成方法

说明书

本发明公开了一种胞苷羟化酶及其基因、用途和新冠口服药Molnupiravir的合成方法，属于生物技术领域。本发明提供了一种全新的热稳定胞苷羟化酶及其突变体，用于将胞苷高效转化为N‑羟基胞苷。所述胞苷脱氨酶突变体，通过将野生型胞苷羟化酶进行N133S/I155V/L157V点突变获得。该突变体和野生酶的最适温度为50℃，解决了N‑羟基胞苷合成酶热稳定性差的技术难题，突变体的催化效率相比野生型提高了5倍左右。本发明还提供了该胞苷羟化酶及其突变体与热稳定脂肪酶配合使用，在生产Molnupiravir中的应用，当底物浓度为120 g/L时，产物得率最高可达64.2％。该方法为新冠口服药Molnupiravir的生产开辟了新的技术，能很好的满足医药领域中对于绿色高效合成路径的需求，具有重要的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种全新的热稳定的胞苷羟化酶及其基因、用途和Molnupiravir的合成方法，并与脂肪酶一起用于生物合成新冠口服药Molnupiravir的技术，属于生物技术领域。

背景技术

莫那比拉韦（Molnupiravir），又称为EIDD-2801/MK4482，是一种羟基胞苷类似物，其进入细胞后的产物通过与RNA聚合酶的竞争作用来增加RNA病毒复制的错误率，从而抑制和清除多种RNA病毒，包括SARS-CoV-2。Molnupiravir已经获得美国食品和药品管理局（FDA）和英国药监局等多个国家批准上市，成为全球首个用于治疗轻度至中度成人新冠感染的口服药物。体外实验证实Molnupiravir具有广谱抗冠状病毒功能，人源化小鼠实验也证实，Molnupiravir可以有效抑制冠状病毒的复制。与此同时，在 Molnupiravir在对轻度或中度新冠肺炎患者开展的3期研究中，与安慰剂相比，能降低患者住院或死亡风险约50%。2a期临床试验显示，Molnupiravir清除病毒的效果也颇为显著，给药5天后，鼻咽拭子已检测不到病毒，而安慰剂组仍有11.1%病毒检测为阳性。今年，世界卫生组织（WHO）的国际专家组发布指南，支持使用新冠口服药物Molnupiravir治疗处于高住院风险的轻症新冠患者。