[发明专利]一种莱古比星的分离纯化方法

权利要求书

1.一种莱古比星的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将莱古比星粗品溶解过滤，得到莱古比星溶液；

2)将步骤1)得到的莱古比星溶液上样到装有硅胶微球的层析柱中进行层析，采用有机溶剂为流动相进行洗脱；

3)分段收集经步骤2)层析、洗脱后的目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总，得到纯化的莱古比星。

2.根据权利要求1所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤2)中，所述硅胶微球的粒径为10-30μm的单分散正相硅胶微球。

3.根据权利要求1或2所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤2)中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷中的任意一种或至少两种的混合物。

4.根据权利要求3所述的分离纯化方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇和二氯甲烷的混合物；

优选地，所述乙醇和二氯甲烷的体积比为(5-10):(90-95)。

5.根据权利要求1-4之一所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤1)中，所述莱古比星粗品采用溶剂进行溶解，所述溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷中的任意一种或至少两种的混合物；

优选地，所述莱古比星粗品的莱古比星的纯度为60-80％；

优选地，所述莱古比星溶液中莱古比星的浓度为1-3mg/mL。

6.根据权利要求1-5之一所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤1)中，所述过滤采用0.3-0.5μm的滤膜过滤。

7.根据权利要求1-6之一所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤2)中，所述洗脱过程为，以低极性的有机溶剂作A相，以高极性的有机溶剂作B相，用A相和B相的混合物作为流动相进行冲洗10-30个柱体积，其中，B相占A相和B相体积总量百分比为5-50％，再用B相再生层析柱；

优选地，所述A相为二氯甲烷；所述B相为乙醇；

优选地，所述流动相的线流速为150-720cm/h。

8.根据权利要求1-7之一所述的分离纯化方法，其特征在于，步骤2)中，上样前还包括对层析柱进行柱前处理的步骤；

优选地，所述柱前处理的步骤具体为先用高极性有机溶剂对层析柱进行除杂，再用低极性的有机溶剂进行平衡1-3个柱体积；

优选地，所述高极性的有机溶剂为乙醇，所述低极性的有机溶剂为二氯甲烷。

9.根据权利要求1-7之一所述的分离纯化方法，其特征在于，所述分离纯化方法包括如下步骤：

1)将莱古比星纯度为60-80％的莱古比星粗品用溶剂溶解，采用孔径为0.3-0.5μm的滤膜进行过滤，得到莱古比星的浓度为1-3mg/mL的莱古比星溶液；

2)采用高极性有机溶剂对层析柱进行除杂，再用低极性的有机溶剂进行平衡1-3个柱体积，将步骤1)得到的莱古比星溶液上样到装有粒径为10-30μm的单分散正相硅胶微球的层析柱中进行层析，采用流动相进行10-30倍柱体积的洗脱，以低极性的有机溶剂作A相，以高极性的有机溶剂作B相，用A相和B相的混合物作为流动相进行冲洗10-30个柱体积，其中，B相占A相和B相体积总量百分比为5-50％，再用B相再生层析柱，所述流动相的线流速为150-720cm/h；

3)分段收集经步骤2)层析、洗脱后的目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总，得到纯化的莱古比星。

10.一种采用权利要求1-9任一项所述的分离纯化方法制备得到的莱古比星。