[发明专利]一种莱古比星的分离纯化方法

说明书

本发明提供了一种莱古比星的分离纯化方法。该分离纯化方法包括如下步骤：1)将莱古比星粗品溶解过滤，得到莱古比星溶液；2)将步骤1)得到的莱古比星溶液上样到装有硅胶微球的层析柱中进行层析，采用有机溶剂为流动相进行洗脱；3)分段收集经步骤2)层析、洗脱后的目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总，得到纯化的莱古比星。本发明莱古比星的分离纯化方法，仅需一步层析纯化即可满足莱古比星纯度＞99％的要求，收率可达70％以上，纯化收率高而稳定，同时本发明的分离纯化方法简单方便，可用于规模化生产，大大降低了生产成本。

技术领域

本发明属于药物纯化技术领域，涉及一种莱古比星的分离纯化方法。

背景技术

阿霉素(多柔比星)是一种广范应用于肉瘤、乳腺癌、卵巢癌、胃癌、肝癌、胶质瘤、骨转移瘤、前列腺癌等实体瘤以及白血病、淋巴瘤等血液系统恶性肿瘤的化疗药物，但是，其心脏毒性限制了该药的使用剂量，而肉瘤、胶质瘤、卵巢癌等多数肿瘤，至今还缺乏肺癌、淋巴瘤等靶向治疗和免疫治疗的疗效突破，化疗仍然是中晚期恶性肿瘤治疗的基石，因此，致力于新型化疗药物的研发，依然是科学家的重中之重。

注射用莱古比星是一种新型的蒽环类抗肿瘤药物，结构式如下：其化学结构设计为3个部分，即6-马来酰亚胺基团(EMC)与四肽氨基酸基团(ALA-ALA-ASN-LEU) 连接，然后再与细胞毒抗肿瘤药物多柔比星相偶联。

注射用莱古比星经过静脉推注后，在血液中通过6-马来酰亚胺基团与白蛋白共价结合形成稳定、无毒性的莱古比星白蛋白复合物。因此，莱古比星在心脏和免疫系统等正常组织中以莱古比星复合物形式存在，从而有效降低多柔比星的心脏毒性和对免疫系统的损伤。

而莱古比星复合物在肿瘤微酸的微环境中能够被肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞所高度表达的Legumain激活，释放活性物质多柔比星和Leu-多柔比星 (Leu-Dox)，从而引发肿瘤细胞免疫原性死亡，刺激机体抗肿瘤免疫的功能，达到抑制肿瘤生长同时促进抗肿瘤免疫的双重效果。

莱古比星临床前的药理毒理学研究数据显示，莱古比星不但具有很好的抗肿瘤活性，且它的毒副作用较多柔比星相比大大降低，正好弥补了蒽环类药物的临床治疗缺陷，可为肿瘤受试者带来福音。

莱古比星是一类我国自主研发的新型蒽环类化疗药物，目前国内外专利、文献等对莱古比星的合成、纯化方法鲜有报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种莱古比星的分离纯化方法，仅需一步层析纯化即可满足莱古比星纯度＞99％的要求，纯化收率高而稳定，同时本发明分离纯化方法简单方便，可用于规模化生产，大大降低了生产成本。

本发明的目的之一在于提供一种莱古比星的分离纯化方法，为达此目的，本发明采用以下技术方案：

一种莱古比星的分离纯化方法，包括如下步骤：

1)将莱古比星粗品溶解过滤，得到莱古比星溶液；

2)将步骤1)得到的莱古比星溶液上样到装有硅胶微球的层析柱中进行层析，采用有机溶剂为流动相进行洗脱；

3)分段收集经步骤2)层析、洗脱后的目的峰值的溶液，对符合要求的组份液进行汇总，得到纯化的莱古比星。

本发明莱古比星的分离纯化方法，以硅胶微球作为固定相，以有机溶剂作为流动相进行层析，仅需一步层析纯化即可满足莱古比星纯度＞99％的要求，纯化收率高而稳定，同时本发明分离纯化方法简单方便，可用于规模化生产，大大降低了生产成本。