[发明专利]禽呼肠孤病毒微滴数字PCR检测引物组合物及其检测方法在审
| 申请号： | 202210318131.9 | 申请日： | 2022-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN114703326A | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;万丽军;王盛;任红玉;谢丽基;谢志勤;邓显文;范晴;罗思思;张艳芳;黄娇玲;曾婷婷;张民秀 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 530001 广西壮族自*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 禽呼肠孤 病毒 数字 pcr 检测 引物 组合 及其 方法 | ||
1.检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的数字PCR试剂或试剂盒，所述数字PCR试剂或试剂盒包括禽呼肠孤病毒引物探针，所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1第472-551位的DNA片段在内的禽呼肠孤病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1第472-551位的DNA片段特异结合的探针组成。
2.如权利要求1所述的数字PCR试剂或试剂盒，其特征在于：所述禽呼肠孤病毒引物探针包括引物ARV-F和引物ARV-R、探针ARV-Probe，
所述引物ARV-F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.2的单链DNA或其衍生物；
所述引物ARV-R为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.3的单链DNA或其衍生物；
所述探针ARV-Probe的核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.4。
3.如权利要求1或2所述的数字PCR试剂或试剂盒，其特征在于：所述ARV-F、ARV-R、ARV-Probe的物质的量比值为4:4:1。
4.如权利要求1-3中任一项所述的数字PCR试剂或试剂盒，其特征在于：所述数字PCR试剂或试剂盒还包括阳性标准品质粒。
5.如权利要求4所述的数字PCR试剂或试剂盒，其特征在于：所述阳性标准品质粒包括核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子。
6.检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的组合物，所述组合物包括禽呼肠孤病毒引物探针，所述禽呼肠孤病毒引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1第472-551位的DNA片段在内的禽呼肠孤病毒基因组DNA片段的引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1第472-551位的DNA片段特异结合的探针组成。
7.如权利要求6所述的组合物，其特征在于：所述禽呼肠孤病毒引物探针包括引物ARV-F和ARV-R、探针ARV-Probe，
所述ARV-F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.2的单链DNA或其衍生物；
所述ARV-R为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.3的单链DNA或其衍生物；
所述ARV-Probe的核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.4。
8.如权利要求6或7所述的组合物，其特征在于：所述ARV-F、ARV-R、ARV-Probe的物质的量比值为分别为4:4:1。
9.权利要求6-8中任一项所述的组合物在如下A1)-A6)中的应用：
A1)检测或辅助检测禽呼肠孤病毒；
A2)检测或辅助检测待测样本是否感染禽呼肠孤病毒；
A3)检测或辅助检测待测病原是否为禽呼肠孤病毒；
A4)制备检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的产品；
A5)制备检测或辅助检测待测样本是否感染禽呼肠孤病毒的产品；
A6)制备检测或辅助检测待测病原是否为禽呼肠孤病毒的产品。
10.检测或辅助检测禽呼肠孤病毒的方法，其特征在于：所述方法包括使用权利要求1-5中任一项所述的数字PCR试剂或试剂盒或权利要求6-8中任一项所述的组合物对待测样品进行数字PCR，根据数字PCR产物确定或辅助确定待测样品是否为禽呼肠孤病毒或，是否含有禽呼肠孤病毒或，是否感染禽呼肠孤病毒。
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