[发明专利]微滴式数字PCR检测鸡毒支原体的组合物及其应用

权利要求书

1.检测或辅助检测鸡毒支原体的组合物，所述组合物包括鸡毒支原体特异引物探针，所述鸡毒支原体特异引物探针由特异扩增含有核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段在内的鸡毒支原体基因组DNA片段的PCR引物和与核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA片段特异结合的探针组成。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述PCR引物由MG-F和MG-R组成，所述探针为MG-Probe，

所述MG-F为核苷酸序列是SEQ ID No.2的单链DNA；

所述MG-R为核苷酸序列是SEQ ID No.3的单链DNA；

所述MG-Probe的核苷酸序列是SEQ ID No.4。

3.如权利要求2或3所述的组合物，其特征在于：所述MG-F、MG-R、MG-Probe的物质的量比值为2:2:1。

4.权利要求1-3中任一项所述的组合物在如下A1)-A6)中的应用：

A1)制备检测或辅助检测鸡毒支原体的产品；

A2)制备检测或辅助检测待测样本是否感染鸡毒支原体的产品；

A3)制备检测或辅助检测待测病原是否为鸡毒支原体的产品；

A4)检测或辅助检测鸡毒支原体；

A5)检测或辅助检测待测样本是否感染鸡毒支原体；

A6)检测或辅助检测待测病原是否为鸡毒支原体。

5.检测或辅助检测鸡毒支原体的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括权利要求1-3中任一组合物中所述的鸡毒支原体特异引物探针。

6.如权利要求5所述的试剂或试剂盒，其特征在于：所述试剂或试剂盒还包括阳性标准品质粒。

7.如权利要求6所述的试剂或试剂盒，其特征在于：所述阳性标准品质粒包括核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的DNA分子。

8.检测或辅助检测鸡毒支原体的方法，其特征在于：所述方法包括使用权利要求1-3中任一项所述的组合物或权利要求5-7中任一项所述的试剂或试剂盒对待测样品进行数字PCR，根据数字PCR产物确定或辅助确定待测样品是否为鸡毒支原体或，是否含有鸡毒支原体或，是否感染鸡毒支原体。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于：所述数字PCR采用的PCR体系中所述MG-F的含量为1μmol/μL，所述MG-R的含量为1μmol/μL，所述MG-Probe的含量为0.5μmol/μL。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述数字PCR中采用的引物退火条件为55℃1分钟。