[发明专利]三化汤基准样品冻干粉指纹图谱的构建方法及其指纹图谱

权利要求书

1.三化汤基准样品冻干粉指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括：

(1)基于三化汤基准样品冻干粉中大黄、枳实和厚朴的指纹图谱的构建

S1、制备多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液；

S2、分别制备没食子酸、原儿茶酸、柚皮苷、紫丁香苷、橙皮素、大黄素、定芦丁、紫花前胡苷、橙皮苷、新橙皮苷、槲皮素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、山奈酚、厚朴酚、和厚朴酚、大黄酸、大黄酚和阿魏酸的单一对照品溶液；

S3、将S1中多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液和S2中的各单一对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，液相色谱条件为：检测波长：0～35min，280nm；35～45min，254nm；45～58min，310nm；58～90min，254nm；记录相应的色谱图；

S4、根据S3中获得的多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液的色谱图及各单一对照品溶液的色谱图，制定基于三化汤基准样品冻干粉中大黄、枳实、厚朴药材的指纹图谱；

(2)基于三化汤基准样品冻干粉中羌活药材的指纹图谱的构建

SS1、制备多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液；

SS2、分别制备羌活醇、阿魏酸苯乙醇酯、异欧前胡素和镰叶芹二醇的单一对照品溶液；

SS3、将SS1中多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液和SS2中单一对照品溶液分别注入高效液相色谱仪，液相色谱条件为：检测波长：246nm；

SS4、根据SS3中获得的多批三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液的色谱图及各单一对照品溶液的色谱图，制定基于三化汤基准样品冻干粉中羌活药材的指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的三化汤基准样品冻干粉指纹图谱的构建方法，其特征在于，S1和SS1中三化汤基准样品冻干粉的供试品溶液制备方法为：取三化汤基准样品冻干粉，加甲醇，超声提取，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的三化汤基准样品冻干粉指纹图谱的构建方法，其特征在于，S2中单一对照品溶液的制备方法为：取没食子酸、原儿茶酸、柚皮苷、紫丁香苷、橙皮素和大黄素，分别用乙醇制成单一照品溶液；取定芦丁、紫花前胡苷、橙皮苷、新橙皮苷、槲皮素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、山奈酚、和厚朴酚、厚朴酚、大黄酸和大黄酚，分别用甲醇制成单一照品溶液；取阿魏酸用热水制成单一对照品溶液。

4.根据权利要求1所述的三化汤基准样品冻干粉指纹图谱的构建方法，其特征在于，S3中液相色谱条件为：色谱柱：Kromasil 100-5-C18色谱柱，流动相：乙腈和0.1％磷酸水溶液，梯度洗脱，洗脱程序为：0～5min乙腈体积15％；5～25min乙腈体积15％～25％；23～30min乙腈体积25％～45％；30～40min乙腈体积45％～50％；40～65min乙腈体积50％～70％；63～75min乙腈体积70％～90％；75～90min乙腈体积90％～60％。