[发明专利]一种基于DNA模板的长链TNA合成方法

权利要求书

1.一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于，其具体操作步骤如下：

(1)、选择特定的TNA的序列；

(2)、通过固相合成等方法获得TNA对应的DNA模板；

(3)、配置TNA延伸的反应体系，进行TNA延伸；

(4)、通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检验所获得的TNA；

(5)、通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳切胶回收TNA。

2.根据权利要求1所述的一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于，

在所述步骤(1)中，特定的TNA的序列包括TNA酶、TNA适体或是和体内RNA形成互补配对可进行基因沉默的TNA。

3.根据权利要求1所述的一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于，

在所述步骤(2)中，通过固相合成等方法获得TNA对应的DNA模板具体是通过固相合成获取所需的DNA模板，或使用聚合酶合成、酶切等方法获得所需的单链DNA片段作为模板。

4.根据权利要求1所述的一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于，在所述步骤(3)中，进行TNA延伸的具体操作方法是：

首先，利用获得的DNA模板和引物，与水和反应缓冲液混合，后在90℃下退火至4℃，置于冰上；

然后，加入Mn²⁺离子和Kod-RIDNA聚合酶；

最后，加入苏糖核苷三磷酸，在55℃下进行引物延伸反应，即TNA转录。

5.根据权利要求1所述的一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于：在所述步骤(4)中，进行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验具体是：通过红外荧光扫描成像仪观察DNA引物部分有Cy5.5荧光基团的TNA链延伸情况，检验转录是否成功。

6.根据权利要求1所述的一种基于DNA模板的长链TNA合成方法，其特征在于：在所述步骤(5)中，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳切胶回收TNA具体是：通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，分离DNA模板和TNA，在紫外光照射下，观察并切下全长TNA部分所对应的条带，通过浸泡凝胶回收得到TNA分子。