[发明专利]一种病毒免提试剂及其在病毒基因组扩增中的应用

权利要求书

1.一种病毒核酸免提试剂，由溶剂和溶质组成；

所述溶剂为pH7.2-7.6、10-100mM Tris-HCl缓冲液；

所述溶质及其浓度分别为0.5-5M醋酸钾、0.8-1.2mM EDTA、0.01-5% Triton X-100、0.01-5% tween20、2.9-30U/mL Cellulase R-10、3-30U/mL Macerozyme R-10、15-150U/mLPectolyase Y23和0.05-0.1% SDS。

2.根据权利要求1所述的病毒核酸免提试剂，其特征在于：

所述溶剂为pH7.4、10mM Tris-HCl；

所述溶质及其浓度分别为0.5M醋酸钾、1mM EDTA、0.01% Triton X-100、0.01%tween20、2.9U/mL Cellulase R-10、3U/mL Macerozyme R-10、15U/mL Pectolyase Y23和0.05% SDS。

3.根据权利要求1所述的病毒核酸免提试剂，其特征在于：

所述溶剂为pH7.4、100mM Tris-HCl；

所述溶质及其浓度分别为5M醋酸钾、1mM EDTA、5% Triton X-100、5% tween20、30U/mLCellulase R-10、30U/mL Macerozyme R-10、150U/mL Pectolyase Y23和0.1% SDS。

4.权利要求1至3任一所述的病毒核酸免提试剂在提取病毒核酸中的应用。

5.权利要求1至3任一所述的病毒核酸免提试剂在扩增病毒核酸中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述扩增为PCR扩增、RT-PCR扩增或荧光定量PCR扩增。

7.权利要求1至3任一所述的病毒核酸免提试剂在检测病毒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述检测适用于病毒核酸染料法检测、病毒荧光染料法检测和病毒荧光探针法检测中的至少一种。

9.样本的病毒核酸的提取方法，包括如下步骤：向样本中加入权利要求1至3任一所述的病毒核酸免提试剂，60-98℃孵育5-10min，得到处理液；该处理液中含有样本的病毒核酸。

10.样本的病毒核酸的扩增方法，包括如下步骤：

（1）向样本中加入权利要求1至3任一所述的病毒核酸免提试剂，60-98℃孵育5-10min，得到处理液；

（2）对步骤（1）得到的处理液进行PCR扩增或RT-PCR扩增；

进一步的，进行PCR扩增或RT-PCR扩增时，反应体系和处理液的比例要求为：每20μl的反应体系中处理液的用量为2μL以下。