[发明专利]聚磷酸盐激酶1突变体及其生产菌的构建与应用在审
申请号: | 202210328759.7 | 申请日: | 2022-03-30 |
公开(公告)号: | CN114703161A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 岳明瑞;谢沛;曹华杰;郭永胜 | 申请(专利权)人: | 新泰市佳禾生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业) 37240 | 代理人: | 尚久恒 |
地址: | 271200 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磷酸盐 激酶 突变体 及其 生产 构建 应用 | ||
1.一种聚磷酸盐激酶1突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述聚磷酸盐激酶1突变体的基因。
3.根据权利要求2所述的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
4.一种聚磷酸盐激酶1突变体生产菌的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将pQE-60质粒用BspEⅠ和AflⅢ双酶切,再连接上序列如SEQ ID NO.5所示的片段,构建得到质粒pQE-N;用AccⅢ和SphⅠ对质粒pQE-N双酶切,再将编码聚磷酸盐激酶1突变体的基因连接到酶切后的质粒上,获得重组表达载体pQE-ppk1;
(2)将获得的重组表达载体pQE-ppk1导入到大肠杆菌中,构建得到聚磷酸盐激酶1突变体生产菌。
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,质粒pQE-N的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
6.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,重组表达载体pQE-ppk1的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
7.由权利要求4-6任一项所述的构建方法构建的聚磷酸盐激酶1突变体生产菌。
8.权利要求7所述的聚磷酸盐激酶1突变体生产菌在发酵生产聚磷酸盐激酶1突变体中的应用。
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