[发明专利]一种依折麦布中基因毒性杂质的检测方法

权利要求书

1.一种依折麦布中基因毒性杂质的检测方法，其特征在于，所述的检测方法包括如下步骤：

(1)配制药物供试品溶液和基因毒性杂质对照品溶液；

(2)将步骤(1)所得的药物供试品溶液和对照品溶液分布注入高效液相色谱仪，采用外标法计算药物中基因毒性杂质的含量；

所述基因毒性杂质为对氟硝基苯、对氟苯胺、对氯苯胺、对羟基苯甲醛中的一种或数种；

所述步骤(2)液相色谱条件为：色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相采用梯度洗脱方法，流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为磷酸盐缓冲液，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％，梯度洗脱程序为：0→35min，90％流动相B；35→40min，90％→20％流动相B；40→50min，20％流动相B，所述百分比均为体积百分比。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相B的磷酸盐缓冲液所用磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸氢二胺、磷酸二氢铵的一种或几种。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相B的磷酸盐缓冲液浓度为0.01～0.1mol/L，磷酸盐缓冲液pH值为5.0～8.0。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述流动相B磷酸盐缓冲液浓度为0.025mol/L，磷酸盐缓冲液pH值为6.0。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相B磷酸盐缓冲液为磷酸二氢钾溶液。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相A为乙腈。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)液相色谱条件为如下梯度洗脱方法：

流动相A：乙腈

流动相B：0.025mol/L的磷酸二氢钾溶液，用磷酸或氢氧化钠溶液调节pH值到6.0，

梯度洗脱如下：

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为150～250mm，内径为3.0～4.6mm，粒径为2.7～5μm，检测波长为210nm，柱温为20～40℃，流速为0.5～2.0ml/min；优选为色谱柱柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm，检测波长为210nm，柱温为25℃，流速为1.5ml/min。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)所用的溶剂为乙腈-磷酸盐缓冲液，体积比为70:30；其中磷酸盐缓冲液所用磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸氢二胺、磷酸二氢铵的一种或几种。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)所用的溶剂为0.025mol/L的磷酸二氢钾溶液或0.025mol/L的磷酸二氢铵溶液。