[发明专利]一种依折麦布中基因毒性杂质的检测方法

说明书

本发明提供一种依折麦布中基因毒性杂质检测方法，使用高效液相色谱法进行检测，采用外标法计算依折麦布中基因毒性杂质的含量。本发明能够同时检测依折麦布中对氟硝基苯、对氟苯胺、对氯苯胺、对羟基苯甲醛四种基因毒性杂质，该方法具有灵敏度高、专属性强、准确度高、耐用性好等优点，可以快速有效的检测依折麦布中的基因毒性杂质的含量，以便控制依折麦布质量。

技术领域

本发明涉及一种依折麦布中基因毒性杂质的检测方法，属于分析检测技术领域。

背景技术

依折麦布(Ezetimibe)，化学名称为1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-(4-氟苯基)-3(S)-羟丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-吖丁啶(氮杂环丁烷)酮，其化学结构式如下：

分子式：C₂₄H₂₁F₂NO₃

分子量：409.43

依折麦布是首个获得FDA批准胆固醇吸收选择性抑制剂药物，适用原发性高胆固醇血症治疗、纯合子家族性高胆固醇血症(HoFH)、纯合子谷甾醇血症(或植物甾醇血症)的治疗。

根据依折麦布原料的合成工艺路线，本品合成中存在引入基因毒性杂质对氯苯胺、对氟苯胺、对羟基苯甲醛和对氟硝基苯的风险，具体结构式如下：

根据依折麦布片说明书中的临床用法用量，本品最大日口服剂量为10mg，因此按照ICHM7评估和控制药物中DNA反应的(诱变的)杂质以限制潜在的致癌风险中关于基因毒性杂质限度的计算方法，依折麦布原料中基因毒性杂质的限度为0.015％。

到目前为止，未见有依折麦布基因毒性杂质的检测方法的报道，因此急需要开发一种快速、有效检测基因毒性杂质的分析方法，以控制依折麦布原料及制剂的质量。

发明内容

本发明的目的是针对现有的技术缺陷，提供一种依折麦布中基因毒性杂质的检测方法，以快速、有效地检测依折麦布原料药及制剂中潜在的基因毒性杂质，以控制依折麦布原料及制剂质量，具有较大的应用价值和经济价值。

为了达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种含依折麦布原料药物的基因毒性杂质的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：

(1)分别配制药物供试品溶液和基因毒性杂质对照品溶液；

(2)将步骤(1)所得的药物供试品溶液和基因毒性杂质对照品溶液分布注入液相色谱仪，完成基因毒性杂质的测定；采用外标法计算药物中基因毒性杂质的含量；

所述的基因毒性杂质为对氟硝基苯、对氟苯胺、对氯苯胺、对羟基苯甲醛中的一种或多种。

所述步骤(2)液相色谱条件为：

色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流动相采用梯度洗脱方法，流动相A为乙腈或甲醇，流动相B为磷酸盐缓冲液，流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比的和始终保持为100％；

梯度洗脱程序为：0→35min，90％流动相B；35→40min，90％→20％流动相B；40 →50min，20％流动相B，所述百分比均为体积百分比。

作为一个优选技术方案，磷酸盐缓冲液所用磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸氢二胺、磷酸二氢铵中的一种或几种；磷酸盐缓冲液浓度为0.01～0.1mol/L；

磷酸盐缓冲液pH值为5.0～8.0；