[发明专利]一种胡子鲇性别特异性分子标记引物及其应用在审
申请号: | 202210381377.0 | 申请日: | 2022-04-12 |
公开(公告)号: | CN114657264A | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 田昌绪;沈奕君;林星桦;周大颜;潘炎杨;郑显龙;李广丽;朱春华;廖愚;肖珊 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学;广西壮族自治区水产引育种中心 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣国华;刘艳丽 |
地址: | 524088 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胡子 性别 特异性 分子 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种胡子鲇性别特异性分子标记引物,其特征是:所述引物为引物NP544,所述引物NP544包括正向引物NP544-F和反向引物NP544-R,所述正向引物NP544-F的碱基序列如SEQID NO:1所示,所述反向引物NP544-R的碱基序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种用于胡子鲇性别鉴定的试剂盒,其特征是:所述试剂盒包括权利要求1中的引物。
3.一种胡子鲇性别鉴定方法,其特征是:在雌雄个体的基因组DNA中采用PCR扩增出特异性片段,具体包括:合成权利要求1中的引物,提取待测胡子鲇的基因组DNA,采用权利要求1中的引物,以基因组DNA为模板,进行PCR扩增,采用毛细管电泳法检测扩增产物,根据测序峰型结果鉴定雌雄个体,其中杂合峰型为雄性个体,纯合峰型为雌性个体。
4.根据权利要求3所述的胡子鲇性别鉴定方法,其特征是:PCR扩增时采用的PCR反应体系为:30ng/μL DNA模板1.0μL,2×Taq MasterMix 12.5μL,10mM正向引物NP544-F和反向引物NP544-R各0.5μL,ddH2O 10.5μL,总共25μL。
5.根据权利要求3所述的胡子鲇性别鉴定方法,其特征是:PCR扩增时采用的PCR反应程序为:94℃预变性5min,94℃变性30sec,58℃退火30sec,72℃延伸30sec,循环35次,72℃延伸10min。
6.权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒或权利要求3-5任一项所述的方法在胡子鲇性别鉴定方面的应用。
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