[发明专利]检测蜂蜜中链霉素和双氢链霉素含量的测定方法及装置

权利要求书

1.一种检测蜂蜜中链霉素和双氢链霉素含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)样品前处理

称取蜂蜜试样，加水混合，然后置于一定温度的水浴中溶解，加水定容，离心；取试样的上清液过滤膜式萃取装置，再加入水洗涤该装置，打入空气使液体全部流出，弃去流出液；用甲酸乙腈洗脱至离心管中，加入氨水水溶液混匀，制得样品；

(2)标准溶液制备

称取链霉素和双氢链霉素的标准品，用水溶解并定容刻度，配制成一定浓度的标准储备液，分别移取相同剂量的链霉素和双氢链霉素标准储备液于同一容量瓶中，加水稀释，制得链霉素和双氢链霉素的混合标准中间液；

取标准中间液，定容溶液稀释成浓度分别为0、0.25、0.5、1、2、4、8μg/L的系列标准溶液，分别上机检测，绘制标准曲线；

(3)检测

将步骤(1)所得的样品与步骤(2)制得的标准溶液采用相同的液相色谱-串联质谱法进行检测。

2.根据权利要求1所述的检测蜂蜜中链霉素和双氢链霉素含量的测定方法，其特征在于，步骤(1)中样品前处理的具体方法为：称取蜂蜜试样5g，精确至0.01g，置于50mL离心管中；加入20mL水，于40℃水浴溶解；加水定容至25mL，4000r/min离心5min；取1mL上清液过滤膜式萃取装置，取1mL水洗涤装置，打入空气使液体全部流出，弃去流出液；取2mL 10％甲酸乙腈洗脱至15mL离心管，打入空气使液体全部流出；加入2mL10％氨水水溶液，涡旋混匀，装瓶。

3.根据权利要求1所述的检测蜂蜜中链霉素和双氢链霉素含量的测定方法，其特征在于，步骤(3)液相色谱的条件为：色谱柱：BEH Amind，2.1×100mm，1.7μm；色谱柱温度：40℃；流动相A：0.5％甲酸水；流动相B：甲醇；进样量：5μL；洗脱方式：梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的检测蜂蜜中链霉素和双氢链霉素含量的测定方法，其特征在于，所述梯度洗脱的条件为：

时间(min)	流速(mL/min)	流动相A(％)	流动相B(％)
0	0.4	10	90
1.5	0.4	10	90
2.5	0.4	65	35
5.0	0.4	75	25
5.1	0.4	10	90
6	0.4	10	90