[发明专利]一种可以分泌溶解性多糖单加氧酶的工程菌株及其构建方法与应用

权利要求书

1.一种可以分泌溶解性多糖单加氧酶的工程菌株，其特征在于：所述工程菌株为带有用于重组表达溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665的热纤梭菌工程菌株。

2.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述菌株为将热纤梭菌cel9K基因中SEQ ID No:1所示的核苷酸序列替换为溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665重组得到的工程菌。

3.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665具有如SEQ ID No:2所示的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665来源于褐色高温双岐菌（Thermobifida fusca YX）。

5.权利要求1所述的可以分泌溶解性多糖单加氧酶的工程菌株的构建方法，其特征在于：将溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665导入热纤梭菌基因组上，构建重组表达该基因的热纤梭菌工程菌，得到可以分泌溶解性多糖单加氧酶的工程菌株。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于：将热纤梭菌基因组上cel9K基因中SEQID No:1所示的核苷酸序列替换为溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665，重组表达溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665，溶解性多糖单加氧酶基因Tfu_1665的基因序列如SEQ ID No:2所示。

7.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于：以热纤梭菌野生菌株为出发菌株构建工程菌株。

8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于：所述出发菌株为热纤梭菌Clostridium thermocellum PN2102，保藏日期为 2021年07月09日，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.22869。

9.权利要求1所述的可以分泌溶解性多糖单加氧酶的工程菌株在木质纤维素水解中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：将热纤梭菌工程菌的厌氧发酵发酵液复配纤维素酶对秸秆纤维进行水解。