[发明专利]一种从动物皮制取水解胶原蛋白的方法及水解胶原蛋白有效
申请号: | 202210386979.5 | 申请日: | 2022-04-13 |
公开(公告)号: | CN114907470B | 公开(公告)日: | 2023-09-08 |
发明(设计)人: | 陈昊;董贺翔;孙宗册 | 申请(专利权)人: | 河北昊鹿翔生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C12P21/06;C07K1/02;C07K1/14 |
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地址: | 052360 河北省石家*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 动物 制取 水解 胶原 蛋白 方法 | ||
本申请涉及胶原蛋白制备技术领域,具体公开了一种从动物皮制取水解胶原蛋白的方法及水解胶原蛋白。一种从动物皮制取水解胶原蛋白的方法,其包括如下操作步骤:(1)动物皮预处理;(2)除杂蛋白:将预处理后的动物皮放至碱溶液中浸泡,沥出,再放至微酸溶液中浸泡,沥出,水洗,晾干,备用;(3)提取胶原蛋白:将除杂后的动物皮加至复合酶溶液中浸泡,超声波酶解,离心,取上清液,冷冻干燥,得到胶原蛋白。本申请水解胶原蛋白提取率最高为88.5%;其蛋白质含量、分子量最高为96.5%和3300Da,水不溶物、水份和灰份含量最低为0.010%、2.17%和1.29%,在提高了水解胶原蛋白提取率的同时,提高了水解胶原蛋白的纯度。
技术领域
本申请涉及胶原蛋白制备领域,更具体地说,它涉及一种从动物皮制取水解胶原蛋白的方法及水解胶原蛋白。
背景技术
胶原蛋白,是动物皮中最主要的纤维蛋白,是动物皮肤的主要成分。胶原蛋白是哺乳动物体内含量最多的蛋白质,占体内蛋白质总量的25-30%,占动物皮肤中蛋白总量的85-90%。因此为了补充人体内胶原蛋白的缺失,胶原蛋白被广泛应用于食品、营养保健、美容以及生物医学材料等诸多领域。
相关技术中,胶原蛋白主要通过酸法、碱法和酶法提取,经过除杂、溶出和纯化三个阶段。这三种方法中,酸法提取时胶原蛋白的色氨酸全部被破坏,丝氨酸和酪氨酸部分被破坏,导致胶原蛋白提取率低;碱法提取胶原蛋白中含羟基和硫基的氨基酸,且所产生消旋作用;酶法提取对胶原蛋白的破坏性小,能更完全的得到活性胶原蛋白,但水解不够彻底。因此,从动物皮中提取水解胶原蛋白的提取率和纯度较低。
发明内容
为了从动物皮中提高水解胶原蛋白的提取率和纯度,本申请提供了一种从动物皮制取水解胶原蛋白的方法及水解胶原蛋白。
第一方面,本申请提供一种动物皮制取水解胶原蛋白的方法,其采用如下技术方案:一种动物皮提取水解胶原蛋白的方法,其包括如下操作步骤:
(1)动物皮预处理:料液比控制为1:(10-20),将动物皮水洗,脱毛处理,沥出,搅碎,水洗,脱脂处理,水洗,备用;
(2)除杂蛋白:料液比控制为1:(20-40),将预处理后的动物皮放至碱溶液中浸泡10-15min,沥出,再放至微酸溶液中浸泡处理5-10min,沥出,水洗,晾干,备用;
所述碱溶液包括如下重量份组分:氢氧化钠1-3份、硫酸钠3-5份、水85-90份;
所述微酸溶液包括如下重量份组分:醋酸1-3份、1mol/L的乳酸5-7份、水90-95份;
(3)提取胶原蛋白:液比控制为1:(15-20),将除杂后的动物皮加至复合酶溶液中浸泡,调节pH为2-6,在30-38℃条件下超声波酶解2-3h,离心,取上清液,冷冻干燥,得到胶原蛋白;
所述复合酶溶液包括如下重量份组分:胃蛋白酶1-5份、枯草杆菌蛋白酶0.5-1份、柠檬酸0.1-0.2份。
通过采用上述技术方案,首先,从动物皮中提取水解胶原蛋白的生产工艺经过动物皮预处理、除杂蛋白和提取蛋白三个步骤:预处理主要是对动物皮进行清洗、脱毛脱脂;除杂是通过碱处理、微酸处理除去杂蛋白;提取蛋白采用复合酶溶液超声波提取。提取水解胶原蛋白的生产工艺整体提取时间短,要解决的技术问题为:提高胶原蛋白的纯度和提取率。
在步骤(2)中,采用碱溶液和微酸溶液处理动物皮,能有效去除动物皮中的可溶性杂蛋白,且能使动物皮的结构变得疏松。并公开了碱溶液的配方和微酸溶液的配方。即利用非活性杂蛋白会在酸、碱条件下溶解,以达到去除杂蛋白的目的。
采用氢氧化钠、硫酸钠和水制成的碱溶液,一方面可使部分杂蛋白溶解在碱溶液中,同时硫酸钠可稳定胶原蛋白分子结构,防止提取蛋白时复合酶溶液破坏胶原蛋白的分子结构,提高了胶原蛋白的提取率。
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