[发明专利]一种牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺在审
申请号: | 202210388673.3 | 申请日: | 2022-04-14 |
公开(公告)号: | CN114703245A | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 王琼;赵亚茹;周芸;张承恩;朱和平 | 申请(专利权)人: | 甘肃中肽生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/34;C07K1/32;C07K1/36;C07K1/14 |
代理公司: | 北京中仟知识产权代理事务所(普通合伙) 11825 | 代理人: | 李祥旗 |
地址: | 744000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种牛 蛋白 肽螯合锌 制备 工艺 | ||
1.一种牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于,包括以下步骤:
S1:取新鲜牛骨经破骨机进行破碎备用;
S2:把破碎后的牛骨放入清洗机,加水清洗,排水清渣;加入NaOH水溶液清洗,沥干洗至中性;再加入H2SO4水溶液清洗,沥干洗至中性;
S3:将清洗干净的牛骨重新注入清水加压煮沸,而后降压恒温蒸煮;
S4:待常压,降至适宜温度,调节pH值,先加入碱性蛋白酶酶解,继续降低温度,再加入胰蛋白酶酶解,煮沸,高温灭酶,迅速冷却至室温;
S5:将步骤S4所得料液通过筒式及板框过滤器,过滤出的清液即为牛骨胶原蛋白肽水溶液;
S6:将步骤S5制得牛骨胶原蛋白肽水溶液用NaOH和HCl调节pH值,加入六水硫酸锌溶液,升温进行螯合反应制得反应液;
S7:将步骤S6反应液用乙醇醇沉,将醇沉液置于低温高速离心机中离心,取沉淀物,再加入乙醇重复醇沉与离心操作2~3次;
S8:将步骤S7得到的沉淀物先预冷冻,再放入冻干机中冻干,即得牛骨蛋白肽螯合锌。
2.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S1中,将新鲜牛骨破碎至5~10cm备用。
3.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S2中,加水清洗时间10min,NaOH水溶液清洗时间30min,H2SO4水溶液清洗时间30min。
4.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S2中,NaOH水溶液为0.2%,H2SO4水溶液为0.3%。
5.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S3中,加压煮沸压力为0.25MPa,继续加热15~20min后,降低压力至0.16MPa,在恒温恒压下煮沸6.5h。
6.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S4中,温度降至55℃,调节pH值至8.0,碱性蛋白酶为3.0%,酶解时间3h;继续降低温度至45℃,胰蛋白酶为2.0%,酶解时间2h;高温灭酶时间15min。
7.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S6中,NaOH为0.1mol/L,HCl为0.1mol/L,调节pH值至7.2,牛骨蛋白肽与锌质量浓度比为2.2:1,升高温度至64.0℃,螯合反应时间2.5h。
8.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S7中,乙醇为95%,离心转速4000r/min;离心时间15~20min。
9.根据权利要求1所述的牛骨蛋白肽螯合锌制备工艺,其特征在于:所述步骤S8中,预冷冻温度为-24℃、冷冻时间5h或温度-80℃、时间1h,冻干机的冻干温度为-45℃、冻干时间24h、压力23Pa。
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