[发明专利]一种具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法

权利要求书

1.一种具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：包括下列步骤：

步骤1：将黑米与水按质量体积比1kg:10~20L混合，然后研磨至细度为5~25µm，得到黑米浆液；

步骤2：向黑米浆液中添加柠檬酸，调节浆液pH值为2.5~4.0，

然后，在20~55℃下，浸提2~6 h，得到黑米花色苷浸提液；

步骤3：对黑米花色苷浸提液进行离心，去除杂质后得到水提液；

步骤4：将水提液放入截留分子量为3000 Da的超滤膜设备的料液桶中，操作压力为0.3Mpa，收集超滤流出液；

步骤5：将超滤流出液通过截留分子量为200~400Da的纳滤膜，操作压力为0.2Mpa；收集浓缩截留液，得到黑米花色苷截留液；

步骤6：将黑米花色苷截留液上聚酰胺树脂柱，上样液量为2~2.5倍树脂柱体积，上样流速为0.8-1.2倍柱体积/小时，当流出液澄清后，以乙醇洗脱树脂柱，洗脱液为2-3倍树脂柱体积，流速为0.8-1.2倍柱体积/小时；将洗脱液在40-50℃下蒸发除去乙醇，得到黑米花色苷浓缩液；

步骤7：对黑米花色苷浓缩液进行冷冻干燥，至水分含量小于或等于5%，得到黑米花色苷粉末；

步骤6：向干燥的叔戊醇中加入黑米花色苷和癸酸，搅拌混合均匀，接着加入干燥Novozym435脂肪酶，最后加入4A分子筛，在50~55℃下振荡反应24~48h；反应完成后进行过滤，滤液干燥后通过萃取和半制备液相色谱法对产物进行分离和纯化；将分离液冷冻干燥至水分含量小于5%，得到紫黑色的矢车菊素-3-O-癸酰葡萄糖苷粉末。

2.根据权利要求1所述的具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：步骤3中，离心的转速为6000~10000转/分钟。

3.根据权利要求1所述的具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：冷冻干燥得温度为-20~-60℃，真空度为-0.09~-0.10MPa。

4.根据权利要求1所述的具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：黑米花色苷和癸酸的摩尔比为1:40~1:50。

5.根据权利要求1所述的具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：加入干燥Novozym435脂肪酶后，反应体系的Novozym435脂肪酶的浓度为10~20g/L。

6.根据权利要求1所述的具有益生活性的酰化矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的制备方法，其特征在于：加入4A分子筛后，体系的4A分子筛的浓度为80-100g/L。