[发明专利]检测血浆中tRF型胃癌分子标记物以及在制备胃癌辅助诊断试剂盒的应用

说明书

本发明涉及一种检测血浆中tRF型胃癌分子标记物以及在制备胃癌辅助诊断试剂盒的应用，其特征在于：包括用于检测血浆样本中tRF‑18‑79MP9P04、tRF‑30‑87R8WP9N1EWJ、tRF‑21‑V2989UV3B以及tRF‑33‑P4R8YP9LON4VDP的试剂，与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明的试剂盒将tRF‑18‑79MP9P04、tRF‑30‑87R8WP9N1EWJ、tRF‑21‑V2989UV3B以及tRF‑33‑P4R8YP9LON4VDP联合作为早期胃癌辅助诊断的标志物，能准确地完成靶标分子的绝对定量检测，及胃早癌的筛查与鉴别。

技术领域

本发明涉及一种血浆中转运RNA的检测方法，尤其涉及一种血浆中tRF型胃癌分子标记物的检测及其应用。

背景技术

根据世界卫生组织2021年报告的流行病学统计数据，2020年世界范围内胃癌的新发病例超过100万例，因胃癌死亡病例超过76万，胃癌是全球排名第五位的恶性肿瘤。在我国，根据2020年发布的流行病学调查显示，2015年胃癌相关性死亡是仅次于肺癌、肝癌的癌症相关性死亡原因。

早诊断早治疗对于改善胃癌的高死亡率具有重大意义。目前对于胃癌诊断的金标准是内窥镜取组织进行病理检查，但由于其有创性在一定程度上限制了它的推广，而传统的肿瘤标志物如癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原125(carbohydrateantigen 125,CA125)和糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)等敏感性和特异性均不高。因此，开发新型胃癌相关标志物对于提高胃癌的早期诊断效率，具有重要的临床意义。

近年来，随着高通量测序技术的发展，人们逐渐发现一类新型非编码RNA——tRNA衍生片段(tRNA derived fragment，tRF)，是由tRNA前体(pre-tRNA)或成熟tRNA在特异性核糖核酸酶(如Dicer酶或血管生成素等)作用下裂解而成。tRF具有多种生物学功能，如参与逆转录调控、逆转录后调控、翻译调控和表观遗传调控等。另外，它们还参与多种癌症的发生发展。因此，它们作为胃癌诊断标志物具有较大潜力。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状而提供一种用于胃癌辅助诊断的检测试剂盒。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：该用于胃癌辅助诊断的检测试剂盒，其特征在于：包括用于检测血浆样本中tRF-18-79MP9P04、tRF-30-87R8WP9N1EWJ、tRF-21-V2989UV3B以及tRF-33-P4R8YP9LON4VDP的其中一个或是四个联合的试剂，其中：

tRF-18-79MP9P04的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，GUUUCCGUAGUGUAGUGG，所述tRF-18-79MP9P04在胃早癌患者血浆中显著下调；所述引物为：F1：5'-GTCCCTGTTGTGTTTCCGTAG 3'；R1：5'-GGTACCTCCTCTCTTCTCTACT-3'；

tRF-30-87R8WP9N1EWJ的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，UCCCUGGUGGUCUAGUGGUUAGGAUUCGGC，所述tRF-30-87R8WP9N1EWJ在胃早癌患者血浆中显著上调；F2：5'-GTGTCCCTGGTGGTCTAGTGGTT-3'；R2：5'-GGTACCTCCTCTCTTCTCTACT-3'；

tRF-21-V2989UV3B的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，UAGGAUGGGGUGUGAUAGGUA，所述tRF-21-V2989UV3B在胃早癌患者血浆中显著上调；F3：5'-CGTTGGTAGGATGGGGTGTGA-3'；R3：5'-GGTACCTCCTCTCTTCTCTACT-3'；