[发明专利]一种快速检测烫发产品中还原剂的方法

权利要求书

1.一种快速检测烫发产品中还原剂的方法，其特征在于，所述还原剂包括半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸和半胱胺盐酸盐；所述方法包括如下步骤：

步骤一，配制标准工作液：精密称取半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸和半胱胺盐酸盐标准品，采用磷酸溶液稀释配制成一系列梯度浓度的混合有半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸和半胱胺盐酸盐的标准工作液；

步骤二，配制样品工作液：准确称取样品0.20～0.30g至50ml离心管中，加入磷酸甲醇溶液，涡旋振荡混匀，然后超声20～40min后冷却至室温并定容，离心，取上清液经微膜过滤后待检测使用；

步骤三，标准曲线的绘制：取标准工作液进样，按照色谱条件进行测定，以峰面积与对应的质量浓度进行线性回归分析；

步骤四，待测样品的检测：取样品工作液进样，按照色谱条件进行测定各个还原剂的峰面积，并根据标准曲线得到对应的质量浓度，最后按照如下公式(1)计算样品中半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐的含量：

式中：

X——试样中半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐的含量，单位为质量分数；

C——从标准曲线中得出的半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐浓度，单位为微克每毫升；

V——试样溶液的体积，单位为毫升；

m——试样质量，单位为克；

k——稀释倍数。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤一中磷酸溶液的体积分数为0.1％。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤二中磷酸甲醇溶液的配制方法如下：量取体积占比为90％的所述磷酸溶液，然后用甲醇进行定容。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中的离心条件为：10000rpm，离心5min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为0.45μm。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件为：

色谱柱：ZORBAX SB-C₁₈色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；

流动相：流动相A相为0.01mol/L磷酸二氢钠水溶液，流动相B相为乙腈，采用梯度洗脱；

流速：0.5-1.5mL/min；

柱温：30～40℃；

检测波长：210nm；

进样体积：8～15μL；

运行时间：40min 。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述0.01mol/L磷酸二氢钠水溶液通过以下步骤进行配制：称取4.24g磷酸二氢钠，8g庚烷磺酸钠，用水超声溶解后定容至4L，用磷酸调节pH至2.15。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：

。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤一中先配制混合标准储备溶液：准确称取半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐标准品各100.0mg于10mL的容量瓶中，用水溶解并定容至刻度线，即得浓度为10mg/mL的标准储备溶液；分别取半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐的标准储备溶液1mL置于同一10mL容量瓶中，加0.1％磷酸溶液定容至刻度，即得半胱氨酸、N-乙酰-L-半胱氨酸、半胱胺盐酸盐浓度均为1000g/mL的混合标准储备溶液。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述标准工作液和样品工作液的上样体积均为10μL。