[发明专利]一种2-乙酰王百合苷A对照品的制备方法

说明书

一种2‑乙酰王百合苷A对照品的制备方法，包括以下步骤：步骤1，百合液提取；对百合鳞茎通过温浸、滤过、提取液合并，并获得百合提取液；步骤2，2‑乙酰王百合苷A粗品制备；对步骤1获得的百合提取液通过离心、聚合物吸附色谱、梯度洗脱、浓缩的方式获得2‑乙酰王百合苷A的粗品；步骤3，2‑乙酰王百合苷A粗品的制备液相分离纯化；对步骤2所得的2‑乙酰王百合苷A粗品通过溶解、微孔滤膜过滤、制备液相分离纯化、浓缩、结晶后得2‑乙酰王百合苷A粗晶；步骤4，2‑乙酰王百合苷A的获取；通过溶解及静置结晶获得2‑乙酰王百合苷A。能够提高2‑乙酰王百合苷A整体的提取率。

技术领域

本发明涉及对照品制备领域，尤其涉及一种2-乙酰王百合苷A对照品的制备方法。

背景技术

百合药食同源，10个品种可供食用，3个品种供药用，即《中华人民共和国药典》收载的卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownii F.E.Brown var. viridulumBaker、细叶百合Lilium pumilum DC.的干燥肉质鳞叶。其食用、药用部位均为百合植物的鳞茎。百合鳞茎含有皂苷、生物碱、多糖、酚酸甘油脂类、氨基酸等多种成分。百合酚酸甘油脂类化合物，其中包括1-O对香豆酰-2-O阿魏酰甘油酯、王百合苷A、王百合苷B、王百合苷C、王百合苷D、王百合苷E、王百合苷F，具有抗炎、抗氧化、抗病毒活性作用（罗林明.中药百合化学成分及药理作用研究进展），该文献中未对王百合苷B异构体2-乙酰王百合苷A介绍说明。

现有技术文献百合药材提取物的质量评价研究（钟霞.百合药材与水提物质量评价研究），公开测定百合药材中王百合苷B含量的方法，采用HPLC法，结果表明80%甲醇、80%乙醇和稀乙醇的提取效率最好，且三者相当，但稀乙醇作为水提物供试品制备的溶剂时会出现结块现象，综合考虑将80 %乙醇作为百合药材和水提物王百合苷B含量测定的提取溶剂。该文献中没有提及其他提取参数及提取方法对2-乙酰王百合苷A提取率的影响。

发明内容

本发明提供了一种2-乙酰王百合苷A对照品的制备方法，以解决上述现有技术的不足，能够提高2-乙酰王百合苷A整体的提取率，具有较强的实用性。

为了实现本发明的目的，拟采用以下技术：

一种2-乙酰王百合苷A对照品的制备方法，包括以下步骤：

步骤1，百合液提取；对百合鳞茎通过温浸、滤过、提取液合并，并获得百合提取液；

步骤2，2-乙酰王百合苷A粗品制备；对步骤1获得的百合提取液通过离心、聚合物吸附色谱、梯度洗脱、浓缩的方式获得2-乙酰王百合苷A的粗品。

步骤3，2-乙酰王百合苷A粗品的制备液相分离纯化；对步骤2所得的2-乙酰王百合苷A粗品通过溶解、微孔滤膜过滤、制备液相分离纯化、浓缩、结晶后得2-乙酰王百合苷A粗晶；

步骤4，2-乙酰王百合苷A的获取；通过溶解及静置结晶获得2-乙酰王百合苷A。

进一步地，步骤1中百合液提取的步骤为：

步骤1.1，将百合鳞茎加入甲醇或乙醇中在预设温度下进行浸泡；

步骤1.2，将浸泡后所得溶液进行多次过滤，去除残留的固体物；

步骤1.3，将步骤1.2所得过滤后的提取液进行合并；

步骤1.4，将步骤1.3所得提取液中的乙醇通过降低压强的方式进行分离并回收，同时获得百合液提取液。

进一步地，步骤1中的甲醇或乙醇的浓度为50%-90%。

进一步地，步骤1中将百合鳞茎加入甲醇或乙醇中在50-80℃的温度下进行浸泡。

进一步地，步骤2中2-乙酰王百合苷A粗品制备的步骤为：