[发明专利]一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱及其建立方法和应用

权利要求书

1.一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱，其特征在于：由35个特征峰组成，以18号峰为参照峰，计算各特征峰与参照峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％范围之内，规定值为：0.11-峰1、0.13-峰2、0.14-峰3、0.18-峰4、0.19-峰5、0.21-峰6、0.27-峰7、0.29-峰8、0.42-峰9、0.59-峰10、0.61-峰11、0.66-峰12、0.72-峰13、0.74-峰14、0.75-峰15、0.87-峰16、0.98-峰17、1.00-峰18、1.13-峰19、1.17-峰20、1.21-峰21、1.43-峰22、1.44-峰23、1.58-峰24、1.68-峰25、1.74-峰26、1.76-峰27、1.77-峰28、1.79-峰29、1.85-峰30、1.93-峰31、2.06-峰32、2.07-峰33、2.12-峰34、2.14-峰35。

2.根据权利要求1所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱，其特征在于：峰2为次黄嘌呤，峰5为尿囊素，峰15为苦杏仁苷，峰17为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，峰18为2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷，峰22为橙黄决明素，峰31为吉马酮。

3.根据权利要求1所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱，其特征在于：峰7、17、19、20、21、23为黄芪特征峰，峰1、2、32为水蛭特征峰，峰24、26、27、28、29、31为莪术特征峰，峰30为三棱特征峰，峰10、14、15为桃仁特征峰，峰4、16为山楂特征峰，峰3、8为土鳖虫特征峰，峰6、22为决明子特征峰，峰13、18、25为何首乌特征峰，峰9为新产生峰。

4.根据权利要求1所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱，其特征在于：芪蛭胶囊由以下重量份数的原料药制成：黄芪100～400份、水蛭40～160份、桃仁75～300份、何首乌75～300份、莪术55～220份、三棱55～220份、决明子62.5～250份、山楂62.5～250份和土鳖虫15～60份。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

取芪蛭胶囊内容物细粉0.5-5.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入适当浓度的甲醇10-100mL，称定重量，超声提取10-100分钟，放冷，再称定重量，补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；

芪蛭胶囊样品的供试品溶液利用超高效液相色谱法进行成分的分离，色谱条件为：Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1×100mm，1.8μm)，流动相乙腈-0.05～0.3％磷酸水溶液，线性梯度洗脱，流速0.2～0.5mL/min，柱温20～40℃，进样量0.5～5μL；

流动相线性洗脱梯度为：0～3min，乙腈1→4％；3～4min，乙腈4→8％；4～7min，乙腈8→11％；7～18min，乙腈11→64％；18～22min，乙腈64→100％；22～24min，乙腈100％；

采用紫外光谱双波长切换扫描方式进行检测，检测波长为：0～5min检测波长为260nm，5～24min检测波长为210nm；

取至少10批芪蛭胶囊样品，分别制备供试品溶液，采集指纹图谱，导入国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，生成对照指纹图谱。

6.根据权利要求5所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱的建立方法，其特征在于：参照物2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷溶液的制备方法为：取2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷对照品适量，加75％甲醇制成浓度为40μg/mL的溶液。

7.根据权利要求5所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱的建立方法，其特征在于：芪蛭胶囊内容物的溶解方法为采用75％甲醇溶解。

8.根据权利要求1～4任意一项所述的一种芪蛭胶囊UPLC-UV对照指纹图谱在芪蛭胶囊整体质量控制中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：以18号峰之外的34个特征峰用于相似度评价，统一积分后进行相似度计算，样品指纹图谱与对照指纹图谱比较的相似度不得低于0.90。