[发明专利]一种体外泡沫细胞模型及其构建方法有效
申请号: | 202210412667.7 | 申请日: | 2022-04-19 |
公开(公告)号: | CN114874972B | 公开(公告)日: | 2023-05-09 |
发明(设计)人: | 曾烨;姚杏红;邱艳;江文丽 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京正华智诚专利代理事务所(普通合伙) 11870 | 代理人: | 何凡 |
地址: | 610064 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 泡沫 细胞 模型 及其 构建 方法 | ||
1.一种体外泡沫细胞模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:向培养基中加入8-15v/v%胎牛血清,然后加入来源细胞进行三维培养,向所得细胞中加入含胎牛血清的培养基继续培养8-15天,制得;
所述来源细胞为内皮细胞;
所述三维培养是先加入来源细胞进行贴壁培养1-6h,然后去除未贴壁细胞,继续添加来源细胞和含胎牛血清的培养基进行培养1-6h,再去除未贴壁细胞,重复上述过程至少2次;每次加入的来源细胞密度为2×105-5×105cells/ml。
2.根据权利要求1所述的体外泡沫细胞模型的构建方法,其特征在于,先加入来源细胞进行贴壁培养1.5h,然后去除未贴壁细胞,继续添加来源细胞和含胎牛血清的培养基进行培养1.5h,然后去除未贴壁细胞,该过程重复3次后,加入含胎牛血清的培养基继续培养11天;其中,每次加入的来源细胞密度为4×105cells/ml。
3.根据权利要求1-2任一项所述的体外泡沫细胞模型的构建方法,其特征在于,三维培养过程中还施加流体剪切力刺激或加入促进脂噬或脂质沉积的物质。
4.根据权利要求3所述的体外泡沫细胞模型的构建方法,其特征在于,流体剪切力刺激是通过层流FSS或振荡FSS的方式进行刺激,层流FSS强度为1-4dyn/cm2,振荡FSS强度为1-5dyn/cm2。
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