[发明专利]一种体外泡沫细胞模型及其构建方法

说明书

本发明公开了一种体外泡沫细胞模型及其构建方法，该体外泡沫细胞模型由来源细胞泡沫化后形成脂质条纹结构，相比来源细胞，泡沫细胞胞质内脂质聚集，脂滴增加，细胞核缩小，细胞体积变小。构建方法包括以下步骤：向培养基中加入胎牛血清，然后加入来源细胞进行三维培养，制得。本发明制得了一种新的泡沫细胞，尤其是通过简单的方式可提高泡沫细胞的产量，不会出现接触抑制生长现象。构建得到的泡沫模型还可以用于有内膜损伤、内膜细胞团和泡沫细胞形成的疾病的药物筛选，如心脑血管疾病、肾小球疾病、肺纤维化等。

技术领域

本发明涉及泡沫细胞模型构建技术领域，具体涉及一种体外泡沫细胞模型及其构建方法。

背景技术

我国心脑血管疾病的发病率和死亡率一直居高不下，其治疗遭遇瓶颈，给社会带来了沉重负担。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是众多心脑血管疾病的共同病理学基础，是引起冠心病和缺血性脑卒中的主要原因。

在动脉粥样硬化形成早期，血液中的单核细胞粘附在损伤的内皮细胞表面，然后穿透内皮层，在内膜下分化成巨噬细胞，在炎症反应环境下巨噬细胞产生的大量自由基使渗入血管内皮下的低密度脂蛋白胆固醇发生氧化修饰，形成氧化型低密度脂蛋白胆固醇，由巨噬细胞清道夫受体吞噬大量氧化型低密度脂蛋白胆固醇，导致巨噬细胞内脂质累积，形成含有许多脂滴的泡沫细胞。随着大量脂质堆积，泡沫细胞死亡破裂，溢出内容物继而引起周围细胞的免疫反应，破坏血管壁的稳定性和完整性，引起血管平滑肌细胞和内皮细胞迁移，最终使得血管内径变窄影响供血。因此，采用人类源细胞构建泡沫细胞形成模型，对研究动脉粥样硬化早期发生机制和筛选有效治疗药物具有重要的意义。

但现有体外泡沫细胞模型的构建均受限于额外添加的氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)或成分不可控的患者血浆作为诱导剂，若能研究一种无需添加诱导剂氧化低密度脂蛋白来构建体外泡沫细胞模型的方法是极其有意义的。

发明内容

为了解决现有技术存在的上述不足，本发明的目的是提供一种体外泡沫细胞模型及其构建方法，该构建过程中无需添加任何诱导剂就能形成体外泡沫细胞，对研究动脉粥样硬化早期发生机制和筛选有效治疗药物具有重要的意义。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：提供一种体外泡沫细胞模型，该体外泡沫细胞模型由来源细胞泡沫化后分泌胶原自发形成脂质条纹结构，相比来源细胞，泡沫细胞胞质内脂质聚集，脂滴增加，细胞核缩小，细胞体积变小。

采用上述技术方案的有益效果为：本发明提供的体外泡沫细胞模型，具有脂质条纹结构，该脂质条纹结构具有丰富的胶原、多糖、脂质、钙等，形成了不同的空间，网络结构，该结构可引起血流动力学变化和血管硬度变化，并且脂质条纹结构以及胞质内脂质成分增多，能够聚集成滴，细胞内TC(总胆固醇)和CE(胆固醇酯)增多，其中CE含量占60％左右。此外，本发明提供的泡沫细胞模型相比来源细胞而言，泡沫细胞的细胞核缩小，细胞体积变小。而现有泡沫细胞的体积相比来源细胞而言是变大的，本发明泡沫细胞变小，细胞核变小，核膜增厚，分泌大量的细胞外胶原，细胞表面糖萼脱落，蛋白聚糖密集，同时还有钙沉积，因此本发明提供了一种新的泡沫细胞。本发明提供的泡沫细胞在结构及组成上都更接近病态的形态，对研究动脉粥样硬化早期发生机制具有更重要的意义，此外该模型还可以用于有内膜损伤、内膜细胞团和泡沫细胞形成的疾病的药物筛选，如心脑血管疾病、肾小球疾病、肺纤维化等。

上述体外泡沫细胞模型的构建方法，包括以下步骤：

向培养基中加入胎牛血清，然后加入来源细胞进行三维培养，制得。