[发明专利]一种山羊痘病毒单克隆抗体及其应用在审

专利信息
申请号: 202210428926.5 申请日: 2022-04-22
公开(公告)号: CN115286699A 公开(公告)日: 2022-11-04
发明(设计)人: 杜吉革;陈小云;刘莹;王团结;朱真;曾荟燕;李婉清;姚文生 申请(专利权)人: 中国兽医药品监察所
主分类号: C07K14/065 分类号: C07K14/065;C07K19/00;C12N5/20;C12N15/70;C12N1/21;C07K16/06;C07K16/08;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/19
代理公司: 北京象合知识产权代理事务所(普通合伙) 11893 代理人: 封明艳
地址: 100081 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 山羊 痘病毒 单克隆抗体 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种具有免疫原性的蛋白rGP32Δ,其特征在于:所述蛋白rGP32Δ的编码序列如SEQID No.1的第4~717位所示;

其是所按照大肠杆菌偏爱密码子对GTPV的P32蛋白的1~238位氨基酸编码序列进行优化,并在C末端引入6×His标签而合成基因片段GGP32Δ。

2.根据权利要求1所述的一种具有免疫原性的蛋白rGP32Δ,其特征在于:所述的蛋白rGP32Δ的氨基酸序列如SEQ ID No.2的第2~239位所示。

3.根据权利要求1所述的一种具有免疫原性的蛋白rGP32Δ,其特征在于,所述的蛋白rGP32Δ为可溶性蛋白;

其是用生产菌株大肠埃希氏菌BL322株经发酵培养、诱导表达、菌体破碎、可溶性抗原蛋白分离纯化后获得,所述大肠埃希氏菌BL322株的保藏号为CGMCC No.24529。

4.一种分泌抗GTPV的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述的杂交瘤细胞株为GTPV杂交瘤细胞p32-11;

其的保藏号为CGMCC No.45132。

5.根据权利要求4所述的一种分泌抗GTPV的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于:所述的杂交瘤细胞株由以下方法制备获得:

S101灭活后的山羊痘病毒作为抗原免疫动物,免疫后动物的脾细胞与SP2/0细胞融合;

S102融合细胞利重组蛋白rGP32Δ进行阳性克隆与亚克隆的筛选,能够稳定分泌抗GTPV单抗的杂交瘤细胞株为GTPV杂交瘤细胞p32-11。

6.一种抗GTPV的单克隆抗体,其特征在于:所述的单克隆抗体由GTPV杂交瘤细胞p32-11分泌;

所述的单克隆抗体为单克隆抗体p32-11。

7.根据权利要求11所述的一种抗GTPV的单克隆抗体,其特征在于,所述的单克隆抗体p32-11从GTPV杂交瘤细胞p32-11的培养液中获得或用杂交瘤细胞株接种到小鼠腹腔产生腹水而获得。

8.一种抗GTPV多克隆抗体的制备方法,其特征在于,所述的制备方法为:用GTPV灭活疫苗免疫羊,攻毒后14天,分离发病羊的血清作为抗GTPV多克隆抗体。

9.一种检测羊痘病毒的产品,其特征在于:所述的产品包含GTPV的单克隆抗体。

10.一种抗GTPV的单克隆抗体的用途,用于制备药剂、试剂、检测板或试剂盒;

所述试剂、检测板或试剂盒用于检测样品中GTPV;

所述药剂用于GTPV的抗体阴性动物的筛选和/或疫苗效力检验。

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