[发明专利]改进型SPE柱及基于其的酒中氨基甲酸乙酯的检测方法

说明书

本发明公开了一种改进型SPE柱，包括：SPE柱管、设置在SPE柱管内的上筛板和下筛板以及由上至下依次填充在上筛板和下筛板之间的固相萃取填料层和除水填料层。本发明还公开了一种酒中氨基甲酸乙酯的检测方法，其采用该改进型SPE柱对样品进行前处理，然后利用气相色谱质谱联用的方法进行检测。本发明提供的改进型SPE柱通过在硅藻土填料下层增加了用于除水的无水硫酸钠，在洗脱目标物的同时就完成了洗脱液除水的操作，可大大提高实验效率，降低人工移液操作，减少误差的发生；本发明提供的检测方法能提高样本富集倍数，降低目标物的检出限；SPE柱中通过增加除水填料，降低了样品中的水进入气相色谱柱的风险，可延长色谱柱寿命。

技术领域

本发明涉及发酵食品中风险物检测筛查技术领域，特别涉及一种改进型SPE柱及基于其的酒中氨基甲酸乙酯的检测方法。

背景技术

白酒、黄酒等酒类的酿造存在发酵过程，而酿酒部分辅料中的含氮化合物会在发酵、蒸馏、老化等过程中生成氨基甲酸乙酯(EC)，氨基甲酸乙酯是一种具有潜在致癌作用的化合物，其成为酒中潜在的食品安全风险。

为准确测定酒中氨基甲酸乙酯的含量，出台有国家标准《GB/T5009.223-2014食品中氨基甲酸乙酯的测定》及行业标准《SN/T 0285-2012出口酒中氨基甲酸乙酯残留量检测方法气相色谱-质谱法》，其中《GB/T5009.223-2014》中样品处理方法为加入氯化钠进行盐析操作，再将样品上样至碱性硅藻土固相萃取柱(SPE)上，经过淋洗后，将目标物用5％乙酸乙酯-乙醚溶液洗脱，再将洗脱液流经装有无水硫酸钠的玻璃漏斗进行脱水，再氮吹浓缩。国标方法涉及使用过漏斗的方式进行样品脱水，这种方式严重影响大批量样品的操作。行业标准《SN/T 0285-2012》则使用加入氯化钠的方式进行盐析反应，再使用二氯甲烷进行液液萃取，将二氯甲烷层转移至浓缩瓶进行减压浓缩至近干，然后加入乙腈复溶样品，再加入正己烷进行液液萃取操作，转移乙腈层溶液并加入乙二胺-N-丙基填料(PSA)至溶液中进行杂质吸附，再使用有机相滤膜进行样品过滤，最后进行检测，整个实验流程比国标方法更是繁琐。

为简化实验流程，各大酒厂则自主研发了酒中氨基甲酸乙酯的测定方法，例如宜宾五粮液股份有限公司公开了“专利CN102944636B蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法”，此方法使用旋转蒸发仪减压蒸馏除去样品中的乙醇，再使用水定容、过滤之后使用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)进样检测，此方法操作步骤少，但使用旋转蒸发仪则意味着样品通量会很低，同时这种前处理方法无法除去酒中的糖类、有机酸等干扰物质，不利于目标物的定量；而贵州茅台酒股份有限公司公开的专利“CN107238673B一种超高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱检测白酒中氨基甲酸乙酯含量的方法”，方法中首先将酒样进行氮吹至乙醇除净，再使用水定容样品，然后使用滤膜进行样品过滤，样品检测则使用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱分析。该方法为了简化样品处理方法，最终均使用LC-MS/MS进行样品检测，而LC-MS/MS仪器价格高昂，不利于方法的推广应用。

所以现在有必要提供一种更可靠的方案。

发明内容