[发明专利]一种益生菌的高效发酵方法

权利要求书

1.一种益生菌的高效发酵方法，其特征在于：包括：

将菌种接种到固体培养基上进行活化；

将经过活化的所述菌种移种到第一液体培养基中进行扩培；

将经过扩培的所述菌种移种到第二液体培养基中进行发酵得到成品；

所述第二液体培养基包括牛肉浸膏3-8质量份、葡萄糖12-20质量份、乳糖4-6质量份、蛋白胨5-10质量份、柠檬酸三铵3-6质量份、磷酸二氢钾0.6-1.4质量份、硫酸锰0.015-0.035质量份、硫酸镁0.03-0.07质量份、氯化钠0.6-1.4质量份、氯化钾0.15-0.35质量份、吐温-80 0.4-0.8质量份以及水1000质量份；

在发酵过程中，向所述第二液体培养基补充磷酸二氢钾、硫酸锰、硫酸镁、氯化钠以及氯化钾，并控制第二液体培养基pH在5.5-6.5。

2.根据权利要求1所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述磷酸二氢钾、硫酸锰、硫酸镁、氯化钠以及氯化钾在第二液体培养基中的初始加入量均为最终加入总量的40-60wt%。

3.根据权利要求1所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：包括：

S1、取菌种按体积比为1：(8-12)的比例接种到固体培养基上，之后置于36.5-37.5℃无氧的环境下活化32-40h；

S2、将经活化的菌种按照55-65cm²固体培养基接种300mL液体培养基的接种比例移种到第一液体培养基中，之后置于36.5-37.5℃无氧的环境下扩培10-15h；

S3、将经扩培的菌种按照8-12vol%的接种量移种到第二液体培养基中，之后置于36.5-37.5℃无氧的环境下发酵18-30h；在发酵过程中，分多次向第二液体培养基中补充磷酸二氢钾、硫酸锰、硫酸镁、氯化钠以及氯化钾，并控制第二液体培养基的pH在5.5-6.5；之后重复本步骤上述工序；

S4、将S3所得菌种转移到洁净容器中，密封保存。

4.根据权利要求2所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述S3中，发酵时以80-120rpm速度对第二液体培养基进行搅拌。

5.根据权利要求2所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述S3中，通过加入氢氧化钠的方式控制第二液体培养基的pH值。

6. 根据权利要求1所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述固体培养基包括葡萄糖16-22质量份、酵母浸粉3-6质量份、蛋白胨10-15质量份、柠檬酸三铵1-3质量份、乙酸钠3-7质量份、磷酸二氢钾1-3质量份、硫酸镁0.05-0.1质量份、氯化钾0.4-0.8质量份、吐温-80 0.2-0.8质量份、琼脂15-25质量份以及水1000质量份。

7. 根据权利要求1所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述第一液体培养基包括牛肉浸膏3-7质量份、葡萄糖15-20质量份、酵母浸粉3-8质量份、蛋白胨8-12质量份、柠檬酸氢二铵2-5质量份、磷酸二氢钾1-4质量份、硫酸锰0.02-0.05质量份、氯化钠2-5质量份、吐温-80 0.5-1质量份、海藻酸钠2-7质量份以及水1000质量份。

8.根据权利要求1所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述第二液体培养基还包括白蛋白肽2-5质量份。

9.根据权利要求8所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述第二液体培养基还包括低聚果糖1-4质量份和菊粉0.5-2质量份。

10.根据权利要求9所述的益生菌的高效发酵方法，其特征在于：所述第二液体培养基还包括瓜尔胶粉1-4质量份。