[发明专利]一种GTF2H4高表达的内皮细胞系

权利要求书

1.一种携带有3xflag标签的GTF2H4 DNA双链片段，其特征在于，其序列如SEQ ID NO：4所示。

2.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体包含如SEQ ID NO：4所示的目的基因序列。

3.如权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述的表达载体选自病毒、真菌或细菌表达载体。

4.一种包含权利要求2或3所述的表达载体的细胞，其特征在于，所述细胞为人微血管内皮细胞HMEC-1。

5.一种重组慢病毒表达载体的制备方法，其特征在于，包括：将慢病毒载体pHBLV-CMV-MCS-EF1-NEO通过限制性内切酶EcoRI和BamHI酶切后，将SEQ ID NO：4所示的DNA双链片段克隆至酶切后的慢病毒载体，得到重组慢病毒载体。

6.一种GTF2H4高表达的人微血管内皮细胞系的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：将重组慢病毒载体联合病毒包装辅助质粒pSPAX2与pMD2G构成三质粒慢病毒系统进行病毒包装，进而转染293T细胞，获得病毒液；所述的重组慢病毒载体为权利要求5所述的制备方法制备的重组慢病毒载体；

步骤2：用步骤1获得的病毒液感染微血管内皮细胞系，筛选获得GTF2H4高表达的微血管内皮细胞系，即GTF2H4高表达的微血管内皮细胞系。

7.权利要求2或3所述的表达载体，权利要求5所述的制备方法制备的重组慢病毒载体在下列A1)A10)中的任意一项中的应用：

A1)：制备用于促进GTF2H4表达的试剂；

A2)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化的产品；

A3)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力的产品；

A4)：制备用于抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力的产品；

A5)：制备用于构建GTF2H4高表达的细胞模型或动物模型的产品；

A6)：体外促进GTF2H4表达；

A7)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化；

A8)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力；

A9)：体外抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力；

A10)：构建GTF2H4高表达的细胞模型。

8.权利要求4所述的细胞在下列B1)-B7)中的任意一项中的应用：

B1)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化的产品；

B2)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力的产品；

B3)：制备用于抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力的产品；

B4)：制备用于构建GTF2H4高表达的动物模型的产品；

B5)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化；

B6)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力；

B7)：体外抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力。

9.权利要求5所述的GTF2H4高表达的人微血管内皮细胞系的制备方法制备的GTF2H4高表达的人微血管内皮细胞系在下列C1)-C7)中的任意一项中的应用：

C1)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化的产品；

C2)：制备用于促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力的产品；

C3)：制备用于抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力的产品；

C4)：制备用于构建GTF2H4高表达的动物模型的产品；

C5)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞发生内皮间质转分化；

C6)：体外促进缺氧条件下微血管内皮细胞迁移能力；

C7)：体外抑制缺氧条件下微血管内皮细胞成管能力。