[发明专利]一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒

权利要求书

1.一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，包括检测幽门螺杆菌23S rRNA基因2142、2143位点的A2142G、A2143G突变的引物探针，检测幽门螺杆菌gyrA基因87位点的N87I、N87K突变的引物探针，检测幽门螺杆菌gyrA基因91位点的D91N、D91Y、D91G突变的引物探针，检测23S rRNA外控的引物探针，检测gyrA外控的引物探针，DNA聚合酶，幽门螺杆菌阳性质控参考品和幽门螺杆菌阴性质控参考品。

2.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述检测幽门螺杆菌23S rRNA基因2142位点的A2142G突变的引物序列如SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2所示，探针序列如SEQ ID NO:3所示；所述检测幽门螺杆菌23S rRNA基因2143位点的A2143G突变的引物序列如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示，探针序列如SEQ IDNO:3所示。

3.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述检测幽门螺杆菌gyrA基因87位点的N87I突变的引物序列如SEQ ID NO:9、SEQID NO:10所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示；所述检测幽门螺杆菌gyrA基因87位点的N87K突变的引物序列如SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示。

4.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述检测幽门螺杆菌gyrA基因91位点的D91N突变的引物序列如SEQ ID NO:14、SEQID NO:15所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示；所述检测幽门螺杆菌gyrA基因91位点的D91Y突变的引物序列如SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示；所述检测幽门螺杆菌gyrA基因91位点的D91G突变的引物序列如SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示。

5.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述检测23S rRNA外控的引物序列如SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21所示，探针序列如SEQ ID NO:3所示。

6.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述检测gyrA外控的引物序列如SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23所示，探针序列如SEQ ID NO:11所示。

7.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述幽门螺杆菌阳性质控参考品为插入幽门螺杆菌23s rRNA基因和gyrA基因的载体质粒，所述23s rRNA基因序列如SEQ ID NO:24所示，所述gyrA基因序列如SEQ ID NO:25所示。

8.根据权利要求1所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括检测内参质控基因的引物探针，所述内参质控基因为人ACTB基因；所述检测内参质控基因的引物序列如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5所示，探针序列如SEQID NO:6所示。

9.根据权利要求1至8任意一项所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述引物3’端引入硫代修饰，所述引物、探针浓度为100-400nM。

10.根据权利要求1至8任意一项所述的一种检测粪便样本中幽门螺杆菌耐药基因突变试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括buffer缓冲液和dNTP，buffer组分包括Tris-HCl、土温、甘油、氯化镁、硫酸铵、氯化钾、PVP、BSA，浓度分别为Tris-HCl 10-100mM，土温0.01％-0.05％，甘油1％-10％，氯化镁1-5mM，硫酸铵10-100mM，氯化钾10-100mM，PVP浓度0.1％-0.5％，BSA浓度0.01％-0.3％，其中Tris-HClpH8.0-8.5。