[发明专利]新型冠状病毒疫苗中德尔塔变异株抗原含量检测方法、试剂和试剂盒

权利要求书

1.一种新型冠状病毒疫苗中德尔塔变异株抗原含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域表位的山羊多克隆抗体包被酶标板，封闭所述酶标板后洗板、拍干；

分别加入待测疫苗抗原样品和抗原标准品，于板内按不同梯度稀释后，将含有所述待测疫苗抗原样品和抗原标准品的酶标板封板37℃孵育1h～2h后洗板、拍干；

加入针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域表位的兔多克隆抗体作为一抗，将含有所述一抗的酶标板封板37℃孵育1h～2h后洗板、拍干；

加入适宜稀释度的辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔Ig抗体作为二抗，得到含有二抗的酶标板，封板37℃孵育1h～2h后洗板；

加入显色液进行显示反应后，测定所述待测疫苗抗原样品的抗原含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述制备针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域(RBD)表位的山羊多克隆抗体包被酶标板包括：

取所述山羊多克隆抗体用包被液稀释后，加入酶标板中，2-8℃孵育过夜；

将所述山羊多克隆抗体包被酶标板洗板拍干，加入封闭液封闭所述酶标板，封闭后置于37℃孵育2h；

将所述山羊多克隆抗体包被酶标板洗板拍干，得到所述山羊多克隆抗体包被酶标板。

3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述测定所述待测疫苗抗原样品的抗原含量包括：

将所述终止反应的酶标板放入酶标仪中，获取所述抗原标准品和所述待测疫苗抗原样品不同稀释度下在酶标仪中波长450nm处的OD值；

依据所述抗原标准品和所述待测疫苗抗原样品不同稀释度下波长450nm处的OD值经对数转换后建立量反应平行线模型曲线，根据所述抗原标准品和所述待测疫苗抗原样品剂量关系的比值计算所述待测疫苗抗原样品的抗原含量。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述酶标仪中还设置波长630nm。

5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述多克隆抗体包被酶标板内多克隆抗体添加量为100μl/孔，所述多克隆抗体浓度为0.5-10μg/ml；和/或者

所述作为一抗的多克隆抗体添加量为100μl/孔，所述多克隆抗体浓度为0.1-0.5μg/ml。

6.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述包被液内含有碳酸氢钠，溶液pH为9.0-9.6。

7.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述封闭液为牛血清白蛋白，所述封闭液添加含量为2％-5％，所述封闭液添加量为200μl/孔。

8.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述山羊多克隆抗体采用商品化重组SARS-CoV-2 Spike RBD(L452，T478K)蛋白免疫山羊制备；和/或者

所述一抗采用商品化重组SARS-CoV-2 Spike RBD(L452，T478K)蛋白免疫家兔制备。

9.一种新型冠状病毒疫苗德尔塔变异株抗原含量检测试剂，其特征在于，包括有：针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域(RBD)表位的山羊多克隆抗体、针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域(RBD)表位的兔多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔Ig抗体中的任意至少一种。

10.一种新型冠状病毒疫苗德尔塔变异株抗原含量检测试剂盒，其特征在于，包括有：针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域(RBD)表位的山羊多克隆抗体、针对新型冠状病毒德尔塔变异株的S蛋白受体结合区域(RBD)表位的兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔Ig抗体、显色液、终止液。