[发明专利]一种羊乳外泌体的分离方法及口服液

权利要求书

1.一种羊乳外泌体的分离方法，其特征在于：

(1)将鲜羊乳进行巴士灭菌后，在4℃下以4000～6000×g离心20～30min，弃去脂肪层，得到脱脂羊乳；

(2)将脱脂羊乳与质量浓度为2％～5％的柠檬酸钠水溶液按体积比为1:1混合，在4℃条件下震摇孵育30～45min，获得的混合乳液在4℃下以7000～9000×g离心20～30min，弃沉淀，得到羊乳-柠檬酸钠混合乳液；

(3)将所得羊乳-柠檬酸钠混合乳液依次使用0.45μm和0.22μm滤膜过滤除杂，所得滤液在4℃下以35000×g离心60～90min，取上清液在4℃下以75000×g离心60～90min，取上清液进一步在4℃下以125000×g离心60～90min，分别收集上层乳清液和羊乳外泌体沉淀。

2.一种羊乳外泌体口服液，其特征在于所述口服液由下述方法制备得到：

(1)将权利要求1分离方法得到的羊乳外泌体沉淀用收集的上层乳清液轻轻吹打混匀，得到羊乳外泌体悬液；

(2)按照质量百分比，将蜂王浆3％～5％、蜂蜜5％～10％、氯化钠0.2％～0.5％、氯化钾0.1％～0.3％、焦磷酸钠0.5％～1％、柠檬酸钠0.5％～1％和35％～45％水充分混匀，使用棕色瓶罐装，封盖后经110～120℃消毒灭菌40～50min，冷却至室温，再添加40％～50％外泌体悬浮液振荡混匀，得到羊乳外泌体口服液。

3.根据权利要求2所述的羊乳外泌体口服液，其特征在于：所述羊乳外泌体悬液中羊乳外泌体的浓度5×10¹¹～1×10¹²颗粒/mL。

4.根据权利要求2或3所述的羊乳外泌体口服液，其特征在于：所述口服液中羊乳外泌体的浓度2×10¹¹～5×10¹¹颗粒/mL。