[发明专利]一种重组森林脑炎病毒的融合蛋白和重组森林脑炎病毒细菌样颗粒疫苗及它们的应用有效
| 申请号： | 202210463653.8 | 申请日： | 2022-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN114853906B | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 王化磊;张梦瑶;金宏丽;焦翠翠;李媛媛;张海丽;黄培;白玉洁;宋雨濛;孙景萱;龚志远 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/866;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 王志新 |
| 地址： | 130062 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 森林 脑炎 病毒 融合 蛋白 细菌 颗粒 疫苗 它们 应用 | ||
1.一种重组森林脑炎病毒的融合蛋白，其特征在于，利用Linker将锚钩蛋白PA3和森林脑炎病毒包膜蛋白E蛋白串联获得融合蛋白；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述Linker的氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示。
3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述锚钩蛋白PA3的氨基酸序列如SEQID NO.6所示。
4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述森林脑炎病毒包膜蛋白E蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.编码权利要求1-4任一项所述的融合蛋白的基因。
6.森林脑炎病毒包膜蛋白E蛋白在制备森林脑炎病毒疫苗中的应用，其特征在于，所述森林脑炎病毒包膜蛋白E蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
7.一种重组森林脑炎病毒细菌样颗粒疫苗，其特征在于，所述重组森林脑炎病毒细菌样颗粒疫苗是将权利要求1-4任一项所述的融合蛋白展示在GEM颗粒表面制备获得的。
8.一种权利要求1-4任一项所述的融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法如下：
(1)将编码锚钩蛋白PA3蛋白的基因与编码森林脑炎病毒包膜蛋白E蛋白的基因通过编码Linker的基因连接获得重组基因；
(2)将步骤(1)获得的重组基因与表达载体pFastBac Dual连接获得重组质粒；
(3)将步骤(2)获得的重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中，获得重组工程菌，提取重组工程菌中的重组杆粒；
(4)将步骤(3)获得的重组杆粒转染Sf9细胞中，获得重组病毒，培养重组病毒获得细胞悬液，融合蛋白即在细胞悬液中。
9.权利要求1-4任一项所述的融合蛋白或者权利要求7所述的重组森林脑炎病毒细菌样颗粒疫苗在制备治疗或预防感染森林脑炎病毒的疾病的药物中的应用。
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