[发明专利]一种检测5种鹅膏肽类毒素、脱磷裸盖菇素和蟾蜍色胺的方法

权利要求书

1.一种检测5种鹅膏肽类毒素、脱磷裸盖菇素和蟾蜍色胺的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）标准溶液的配制

将α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、脱磷裸盖菇素和蟾蜍色胺毒素标准品配制成标准使用液；将脱磷裸盖菇素-d₁₀、蟾蜍色胺-d₄配制成标准使用液；

（2）标准曲线的制作

吸取上述标准使用液，用空白样品基质配制成系列浓度的标准工作液，经UPLC-MS/MS分析，以5种鹅膏肽类毒素以定量离子峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准工作曲线，脱磷裸盖菇素与蟾蜍色胺以定量离子峰面积与对应内标峰面积比值为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准工作曲线；

（3）样品前处理

称取蘑菇干粉样品，进行前处理，得带测定的样品，其中，前处理的方法包括：

将蘑菇干粉用甲醇超声提取，旋蒸至干，复溶；用强阳离子交换固相萃取小柱净化后，氮气吹干、定容、涡旋混匀、离心取上清，得待测定的样品；

（4）测定

a、色谱条件：

T3反相色谱柱：HSS T3 1.8 μm, 2.1×100 mm或等效柱；柱温：40℃；进样体积：10 μL；流动相A：含0.1%甲酸的5 mmoL乙酸铵水溶液；流动相B：乙腈；洗脱程序为：

时间（min）	流动相A（%）	流动相B（%）	流速（mL/min）
3	95	5	0.3
5	60	40	0.3
6	5	95	0.3
7	5	95	0.3
7.5	95	5	0.3
10	95	5	0.3

b、质谱条件

离子源为电喷雾离子源，采用正离子模式，多离子反应监测，雾化气流量：3 L/min；加热气流量：15 L/min；接口温度：400℃；DL温度：250℃；加热块温度：400℃；干燥气流量：3L/min；

c、定量/定性测定。