[发明专利]一种靶向治疗炎症疾病的药物

说明书

本发明公开了一种靶向治疗炎症疾病的药物，属于制药领域。本发明以靶向TNF‑α的DNA适配体修饰的四面体框架核酸为载体，装载甲氨蝶呤形成了一种复合物。本发明的复合物对MTX的包封率高，提高了MTX的生物利用度。在LPS诱导的巨噬细胞炎症模型中，本发明的复合物能够显著降低巨噬细胞的ROS和NO水平，保护细胞活性，促进M1型巨噬细胞向M2型极化，减少炎症因子(包括IL‑1β、IL‑6和TNF‑α)的表达和分泌。在胶原诱导的类风湿关节炎大鼠模型中，本发明的复合物能够显著改善类风湿关节炎大鼠的关节肿胀和炎症，靶向有炎症的关节组织，缓解软骨的缺失，减轻类风湿关节炎。本发明的复合物合成简单、结构稳定，具有优异的生物安全性和吸收效率，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种靶向治疗炎症疾病的药物及其制备方法。

背景技术

类风湿关节炎是一种以炎性滑膜炎为主的疾病，其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，可以导致关节畸形及功能丧失，最终导致严重残疾、全身并发症甚至死亡。RA的病理进展与免疫系统紊乱密切相关，免疫系统紊乱使巨噬细胞和中性粒细胞广泛浸润，促进成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)的快速增殖。其中，活化的巨噬细胞作为最显著的细胞，在RA炎症关节的进展中起着关键作用。M2巨噬细胞可以通过分泌抗炎细胞因子修复受损组织。M1巨噬细胞通过分泌大量炎症因子破坏组织，如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)以及RA病变中的活性氧(ROS)。研究发现，TNF-α通过诱导其他促炎细胞因子的分泌，在RA炎症的形成和进展中发挥重要作用。

在1951年Gubner首次成功地应用甲氨蝶呤(简称MTX)治疗RA和银屑病患者，取得了不错的疗效。目前MTX已广泛用于各种炎症疾病，比如类风湿关节炎、幼年特发性关节炎、皮肌炎、血管炎、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮等等。MTX用于治疗RA时多为口服给药，然而RA作为一种慢性免疫性疾病，需长期给药，很多患者因为MTX严重的副作用不得不停用该药。为解决此难题，自20世纪70年代研发了用于关节腔注射的MTX，起效迅速，可发挥较好的局部作用。但其从关节腔清除速度快，因易渗漏而引起全身吸收，故限制了其更广泛的应用；此外，长期、频繁地注射给药也降低了患者的依从性，甚至会造成关节感染。随着可生物降解聚合物微粒分散体系研究的日益深入，以高分子材料作为载体制备关节腔注射用微球和纳米粒已成为关节腔缓释制剂的研究热点。莫丽都尔等(中国新药杂志，2007，16(15)：1187)以聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(简称PLGA)为载体制备了一种关节腔注射用甲氨蝶呤缓释微球，延长了MTX的缓释时间，增加了药物在关节内的保留时间。但是，PLGA在体内完全降解后会产生酸性产物，甚至在注射初期引发急性炎症反应。因此，需要开发出生物相容性更高的MTX载药体系。

四面体框架核酸(tetrahedral framework nucleic acids,tFNA)是一种由4条单链DNA通过变性和复性，进而链间碱基互补配对形成的一种四面体结构，它易于合成，生物相容性高，通常用作某些药物的载体。但是，传统的负载MTX的四面体框架核酸对类风湿关节炎的治疗效果有限，难以高效的靶向有炎症的关节组织。

综上，亟需开出一种生物相容性高，靶向作用强，对炎症疾病具有优异的治疗效果的药物。

发明内容

本发明要解决的问题是：提供一种新的靶向治疗炎症疾病(特别是类风湿关节炎)的药物及其制备方法。

本发明提供了一种复合物，它是以靶向TNF-α的DNA适配体修饰的四面体框架核酸和抗炎药物为原料制备而成的复合物，所述靶向TNF-α的DNA适配体修饰的四面体框架核酸和抗炎药物的摩尔比为1：(50～500)。

进一步地，所述靶向TNF-α的DNA适配体修饰的四面体框架核酸和抗炎药物的摩尔比为1：100。

进一步地，所述靶向TNF-α的DNA适配体的序列如SEQ ID NO.5所示；