[发明专利]一种具有显著降脂和降胆固醇功效的刺梨多糖及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种具有显著降脂和降胆固醇功效的刺梨多糖，其特征在于，所述刺梨多糖的平均分子量为37~42 kDa，颗粒尺寸为200 ~ 220 nm；

所述刺梨多糖是一种杂多糖，由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖糖醛酸和半乳糖醛酸组成，摩尔百分比含量分别为3~4%、16~17%、15~16%、5~6%、1~2%、5~6%、52~53%；

所述具有显著降脂和降胆固醇功效的刺梨多糖的制备方法包括以下步骤：

1）脱脂：将刺梨鲜果清洗、去籽、干燥、磨粉、过筛得刺梨粉末，与体积浓度80~95%的乙醇溶液按质量体积比为1:3~1:10 g/mL混合，于60 ~ 75°C下加热回流1~4 h，过滤得到残留物，残留物重复脱脂1~3次，然后干燥；

2）多糖提取：将步骤1）干燥残留物按质量体积比为1:20 ~ 1:40 g/mL与碱液混合，于80~95 °C下浸提1~3 h，提取液离心得上清液，滤渣重复提取1~3次；将提取上清液合并，调节pH至中性，减压浓缩到原体积的1/3~1/6，得到刺梨粗多糖浓缩液；所述碱液为0.3~0.5mg/mL的NaOH溶液，pH为12.0±0.3；调节pH至中性所用试剂为盐酸溶液，浓度为2 ~ 6 M；

3）脱蛋白：将Sevag试剂与步骤2）的刺梨粗多糖浓缩液按体积比为1:3~1:4混合，振荡30~40 min，离心得上层刺梨多糖溶液，重复8 ~ 15次，减压蒸发除去残留的Sevag试剂；

4）脱色：将步骤3）中脱蛋白后的刺梨多糖提取液与大孔树脂按体积比5:1 ~ 8:1混合，室温下摇荡脱色6 ~ 12 h，抽滤分离大孔树脂得到脱色的多糖滤液；

5）透析：将步骤4）中刺梨多糖滤液移入1000~5000 Da的透析袋，于0 ~ 5 °C蒸馏水中透析24~48 h，减压浓缩至原体积；

6）醇沉和干燥：往步骤5）中刺梨多糖溶液加入无水乙醇并不断搅拌至乙醇体积浓度为60~90%，于0~5 °C中静置12 ~ 24 h，离心得到刺梨多糖沉淀，用去离子水复溶，-45 ~ -75°C下冷冻干燥后得到刺梨多糖。

2.根据权利要求1所述的具有显著降脂和降胆固醇功效的刺梨多糖，其特征在于，所述刺梨多糖具有吸附胆固醇和胆酸盐能力，并降低消化过程中油脂的酶解速率和脂肪酸释放量，减轻HepG2细胞的脂质积累。

3.权利要求1-2任一项所述的一种具有显著降脂和降胆固醇功效的刺梨多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）脱脂：将刺梨鲜果清洗、去籽、干燥、磨粉、过筛得刺梨粉末，与体积浓度80~95%的乙醇溶液按质量体积比为1:3~1:10 g/mL混合，于60 ~ 75°C下加热回流1~4 h，过滤得到残留物，残留物重复脱脂1~3次，然后干燥；

2）多糖提取：将步骤1）干燥残留物按质量体积比为1:20 ~ 1:40 g/mL与碱液混合，于80~95 °C下浸提1~3 h，提取液离心得上清液，滤渣重复提取1~3次；将提取上清液合并，调节pH至中性，减压浓缩到原体积的1/3~1/6，得到刺梨粗多糖浓缩液；所述碱液为0.3~0.5mg/mL的NaOH溶液，pH为12.0±0.3；调节pH至中性所用试剂为盐酸溶液，浓度为2 ~ 6 M；

3）脱蛋白：将Sevag试剂与步骤2）的刺梨粗多糖浓缩液按体积比为1:3~1:4混合，振荡30~40 min，离心得上层刺梨多糖溶液，重复8 ~ 15次，减压蒸发除去残留的Sevag试剂；

4）脱色：将步骤3）中脱蛋白后的刺梨多糖提取液与大孔树脂按体积比5:1 ~ 8:1混合，室温下摇荡脱色6 ~ 12 h，抽滤分离大孔树脂得到脱色的多糖滤液；

5）透析：将步骤4）中刺梨多糖滤液移入1000~5000 Da的透析袋，于0 ~ 5 °C蒸馏水中透析24~48 h，减压浓缩至原体积；

6）醇沉和干燥：往步骤5）中刺梨多糖溶液加入无水乙醇并不断搅拌至乙醇体积浓度为60~90%，于0~5 °C中静置12 ~ 24 h，离心得到刺梨多糖沉淀，用去离子水复溶，-45 ~ -75°C下冷冻干燥后得到刺梨多糖。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤2）、3）和6）所述离心的离心力为4500~8000 g，离心时间5~15 min。