[发明专利]一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株及其应用

说明书

本发明提供了一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株及其应用。该菌株命名为弯孢菌CLD001（Curvularia CLD001），于2022年4月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.40127，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏地址的邮编为100101。该菌株能够吸附重金属镉。

技术领域

本发明涉及弯孢菌(Curvularia)，具体涉及一株从水稻中分离出的具有高抗镉和高效吸附镉的弯孢菌株，其能高效吸附重金属镉。

背景技术

镉是重要的环境污染物，主要来源于矿产冶炼、电镀和塑料制品生产等。镉污染很难在环境中降解，往往通过食物链途径进入生物体内。当生物体内的镉含量超过一定限量时﹐便会破坏生物体正常的新陈代谢，从而危害生态环境及人畜健康。当前，重金属污染日益严重，污染治理已迫在眉睫，重金属污染中主要是镉污染。

传统的修复污水中重金属离子方法存在许多无法避免的副作用：如处理效率较低、成本高、一级存在二次污染等问题。近10年来，生物吸附作为一个理想的效率高、成本低的污水处理方法被呼吁，微生物可通过生物转化和生物吸附改变土壤中重金属的生物有效性，从而清除或稳定环境中的重金属，生物法治理重金属污染已被认可并广泛应用，因此，寻找到一种具有重金属镉吸附功能的微生物去修复污水具有十分重要的意义。

当前，弯孢菌(Curvularia)的研究大多集中在其致病性以及分类鉴定上，对其重金属抗性特别是镉耐受性和镉吸附性的研究报道极少。

发明内容

本发明的目的在于提供一株耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株，及其吸附镉的应用。

本发明所述耐镉且能吸附镉的弯孢菌菌株从水稻种子中自然分离获得，对其进行了形态学、生理生化性质和ITS测序鉴定，将该菌株命名为弯孢菌CLD001(CurvulariaCLD001)，属半知菌类、丛梗孢目、暗梗孢科、弯孢属。该菌株已于2022年4月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.40127，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏地址的邮编为100101。

具体地，该菌株的ITS序列如SEQ ID No.3所示。

本发明还提供了所述的弯孢菌CLD001菌株的分离纯化、鉴定的方法以及该菌对镉吸附性的研究，包括如下步骤：菌种分离纯化、原种制作、CLD001菌株对镉吸附性研究。所述原种制作是指将弯孢菌CLD001母种接种到液体培养基或固体培养基中得到液体菌种或固体菌种。

具体地，菌种分离纯化的操作如下：

(1)耐镉菌株的初筛：从水稻种子中分离出耐镉的菌株，将菌株接种到氯化镉浓度为25mmol/L(5709mg/L)的固体平板培养基上筛选培养，每个浓度设置3个重复；28℃恒温培养4～8d，观察记录单菌落特征；

(2)耐镉真菌复筛：在无菌条件下，用接种针挑取氯化镉浓度为25mmol/L(5709mg/L)平板固体培养基上各个单菌落分别划线于浓度梯度为25mmol/L(5709mg/L)和50mmol/L(11418mg/L)的PDA氯化镉固体平板培养基上筛选耐镉能力强的菌株，得到的菌株在平板上划线转接3次以上进行菌株纯化，并挑选长势好、菌落饱满的单菌接种到马铃薯培养基平板，作为弯孢菌CLD001母种。

具体地，得到所述液体菌种的操作如下：弯孢菌CLD001母种转接到PDA液体培养基中，置于180r/min的摇床上，28℃暗光培养4～8d，得到液体菌种。

进一步地，得到所述固体菌种的操作如下：弯孢菌CLD001母种接入PDA固体培养基中，28℃培养10～15d，得到固体菌种。