[发明专利]筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型及其构建方法、应用

权利要求书

1.一种筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型，其特征在于：采用Flp-In^TM-CHO作为目的细胞，将含有CYP3A7和POR的编码DNA序列分别转染入目的细胞，得到所述筛选胎儿代谢毒性外源化合物的细胞模型。

2.如权利要求1所述的筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型，其特征在于：所述筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型具有两个指标，细胞活力和半数抑制浓度(IC₅₀)。

3.一种如权利要求1所述的筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型构建方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1：在基础培养基中复苏Flp-In^TM-CHO细胞，所述基础培养基含10％胎牛血清和1％青霉素和链霉素的F12；

S2：构建含CYP3A7编码DNA序列的pcDNA5质粒；

S3：构建含POR编码DNA序列的pCMV质粒；

S4：将步骤S2构建的含CYP3A7编码DNA序列的pcDNA5质粒稳定转染入步骤S1传代后的Flp-In^TM-CHO中，在筛选DMEM/F12-1培养基中培养，所述筛选DMEM/F12-1培养基含10％胎牛血清和500μg/ml潮霉素的F12；

S5：将步骤S3构建的含POR编码DNA序列的pCMV质粒稳定转染入步骤S4得到的Flp-In^TM-CHO-CYP3A7细胞中，在筛选DMEM/F12-2培养基中培养，所述筛选DMEM/F12-2培养基含10％胎牛血清、500μg/ml潮霉素和50μg/ml嘌呤霉素的F12，得到所述筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型。

4.一种如权利要求1所述筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型在筛选具有代谢毒性的外源化合物中的应用。

5.如权利要求4所述的筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型在筛选具有代谢毒性的外源化合物中的应用，其特征在于：当细胞活力降低时，则提示所述待筛选外源化合物具有经CYP3A7介导的代谢毒性。

6.如权利要求4所述的筛选经CYP3A7介导代谢毒性外源化合物的细胞模型在筛选具有代谢毒性的外源化合物中的应用，其特征在于：根据不同待筛选外源化合物的IC₅₀值能对不同外源化合物代谢毒性进行比较。