[发明专利]一种负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.一种负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将脱脂米糠与5倍体积的去离子水混合，将混合物均质3～5min后常温下搅拌1～2h，使用3.0M氢氧化钠将混合物pH调至9.5，于55℃下磁力搅拌1～2h，然后在室温下以10000r/min离心30min，离心上清液于纱布过滤后，用2.0M盐酸将滤液pH调至为4.4，静置30min后，在室温下以10000r/min离心30min取沉淀，用去离子水洗涤沉淀2次得中性蛋白溶液，在-20℃下冷冻24h，然后置于冻干机中，0.1～0.5mbar、-60℃～-50℃下冷冻干燥48h，得到米糠蛋白；

2)将步骤1)得到的米糠蛋白溶解于去离子水中，配制成10mg/mL的米糠蛋白溶液，用1.0M氢氧化钠调整溶液的pH，得到米糠蛋白储备液；

3)在常温下，将NaCl溶液置于转速为600r/min的磁力搅拌器上，边搅拌边加入步骤2)得到的米糠蛋白储备液以及酪蛋白酸钠储备液，然后用1.0M氢氧化钠将混合液pH调至10.0～12.0，继续磁力搅拌30min后，在黑暗条件下加入姜黄素-乙醇溶液，充分混合均匀后，加入阿拉伯胶储备液，继续搅拌1～2h，旋转蒸发除去乙醇，用0.05M盐酸缓慢调整混合体系的pH，最后以3000r/min离心10min，取离心上清液，得到负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒水溶液；

4)将步骤3)得到的负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒水溶液在-20℃下冷冻24h，然后置于冻干机中，0.1～0.5mbar、-60℃～-50℃下冷冻干燥48h，得到负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述米糠蛋白储备液的pH为10.0～12.0。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述NaCl溶液的浓度为5～25mmol/L。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述酪蛋白酸钠储备液的制备方法：将酪蛋白酸钠粉末溶解于去离子水中，得到10mg/mL的酪蛋白酸钠储备液。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述姜黄素-乙醇溶液的制备方法：将姜黄素粉末溶解于无水乙醇中，得到0.15mg/mL的姜黄素-乙醇溶液，4℃避光保存备用。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述阿拉伯胶储备液的制备方法：将阿拉伯胶粉末溶解于去离子水中，得到10mg/mL的阿拉伯胶储备液。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，按体积比，NaCl溶液:米糠蛋白储备液:酪蛋白酸钠储备液:姜黄素-乙醇溶液:阿拉伯胶储备液＝15:1:0.5～2.5:18～21:2。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤3)中，所述混合体系的pH为4.0～4.8。

9.根据权利要求1-8任意一项所述的一种负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述的负载姜黄素的米糠蛋白-阿拉伯胶-酪蛋白酸钠纳米颗粒粒径为310.2～1000nm，PDI为0.136～0.491，Zeta电位为-14.2～-20.2mV，姜黄素包埋率为58.3～98.5％，姜黄素在模拟胃液的生物利用度为15.1～18.3％，在模拟肠液的生物利用度为23.1～27.2％。