[发明专利]一种聚多巴胺纳米囊泡递送系统及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种聚多巴胺纳米囊泡递送系统，其内装载递送物并在表面镶嵌靶向抗体，制备方法包括：采用脂质体进行递送物的装载；将合成的脂质体加入第一缓冲液，并加入盐酸多巴胺，合成递送物@聚多巴胺；将递送物@聚多巴胺离心，得到的沉淀用含有亲和素的第二缓冲液溶解，得到递送物@聚多巴胺@亲和素；将递送物@聚多巴胺@亲和素与生物素标记的抗体共孵育，得到聚多巴胺纳米囊泡递送系统‑递送物@聚多巴胺@抗体。上述制备方法不借助转染试剂即可获得递送物的转染，细胞可对递送系统进行胞吞作用，达到细胞内化的功能；蛋白抗体的修饰能够有效地完成肿瘤的靶向作用，上述递送系统可有效的应用于体内的肿瘤靶向治疗。

技术领域

本发明涉及靶向纳米材料的医药技术领域，尤其涉及一种聚多巴胺纳米囊泡递送系统及其制备方法，以及所述聚多巴胺纳米囊泡递送系统中在靶向肿瘤中的应用。

背景技术

干扰RNA(si-RNA)是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，在生物学上有许多不同的用途。已知siRNA主要参与RNA干扰(RNAi)现象，以带有专一性的方式调节基因的表达。siRNA作为生物医学常用的一种研究手段，广泛应用于特定基因的功能研究中。具有类似调控RNA表达的质粒，也是生物医学常用的研究手段；其具有环状双链DNA结构，转染进细胞后能够过表达特定基因，以期改变寄主细胞原有的性状或产生新的物质。

但是上述研究手段的应用需要借助于载体的帮助才能有效的转入特定细胞中，目前最常用的载体是脂质体。上述脂质体对于siRNA或质粒的细胞转染过程仍需要借助于转染试剂的帮助，如lip3000等，上述转染试剂对于细胞具有一定程度的毒性，同时对于转染的条件要求较高，且不具备体内应用的价值，只能用于细胞水平的转染。另外，市面上常见的脂质体转染试剂具有以下缺陷：干扰RNA或者质粒装载效率低；干扰效率低；不具备肿瘤靶向性；生物相容性低。

聚多巴胺(PDA)作为生物材料的一种，是一种由多巴胺自氧化产生的深棕黑色不溶性生物聚合物。聚多巴胺纳米结构的合成和在生物医学领域的应用快速增长，如药物输送、光热疗法、骨和组织工程以及细胞粘附和图案化，以及抗菌应用。PDA也是天然黑色素(eumelanin)的合成类似物，具有良好的生物相容性，极大的降低了纳米材料的生物毒性，应用前景广泛。

癌症是目前危害人类健康的主要疾病之一，癌症的治疗也面临着巨大的挑战。化疗是临床上治疗癌症的主要手段，但是目前传统的化疗药物缺乏靶向性，在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常细胞产生毒性，引起的毒副作用使患者不能耐受。虽然目前涉及少量PDA制备的纳米药物载体能够靶向到特定肿瘤位点，在一定程度上能解决肿瘤化疗问题，但其治疗效果仍不理想。因此，迫切需要寻找一种生物相容性好、具有高度靶向性、且能同时有效调控肿瘤生长的制剂，从而推进其临床化应用。

发明内容

为了克服现有技术中存在的至少一个问题，本发明通过多步骤合成的靶向性聚多巴胺纳米囊泡递送系统能够有效的装载质粒或抑制剂(inhibitor)来调控肿瘤生长并在囊泡表面镶嵌肿瘤高表达的蛋白抗体以获得肿瘤靶向性达到体内外高效递送特定物质的目的；同时具有良好的生物相容性，能够有效的被肿瘤细胞所吞噬，有效的对肿瘤原癌或者抑癌基因表达进行调控；体内外实验均证实此聚多巴胺纳米囊泡递送系统分别在细胞水平以及动物模型中均具备有效的调控肿瘤生长效果。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面是提供一种聚多巴胺纳米囊泡递送系统，所述聚多巴胺纳米囊泡递送系统中装载递送物并在囊泡表面镶嵌抗体其中，所述递送物选自靶向癌症原癌基因或者抑癌基因的抑制剂、质粒中的一种，所述抗体为癌症高表达的蛋白抗体。

进一步地，所述癌症包括肾癌、乳腺癌、皮肤癌、肝癌、胃癌、肠癌、前列腺癌等。

可选择地，上述递送物也可为干扰RNA。采用干扰RNA时，治疗乳腺癌时，干扰RNA为si-LINC00355，抗体为HER2抗体；治疗肝癌时，干扰RNA为si-lncRNA DLX6-AS1，抗体为Hec1抗体。