[发明专利]一种MGI平台转座酶双端标签文库的制备

权利要求书

1.一种寡核苷酸对，其包含第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，其中：

第一寡核苷酸自5’端向3’端方向包含第一双端文库夹板序列、第一标签序列、修饰的单端文库夹板全序列和第一衔接序列，

第二寡核苷酸自5’端向3’端方向包含第二双端文库夹板序列、第二标签序列和第二衔接序列，第一双端文库夹板序列是

5’-CTCTCAGTACGTCAGCAGTT-3’(SEQ ID NO：7)所示序列，第二双端文库夹板序列是5’-GCATGGCGACCTTATCAG-3’(SEQ ID NO：8)所示序列，单端文库夹板全序列是

5’-CAACTCCTTGGCTCACAGAACGACATGGCTACGATCCGACTT-3’

(SEQ ID NO：9)所示序列，修饰的单端文库夹板全序列中的修饰包含3’端核苷酸缺失7、8、9、10、11、12或13个，

第一衔接序列与第三寡核苷酸的第一转座引物结合序列互补，第二衔接序列与第四寡核苷酸的第二转座引物结合序列互补，或者，第一衔接序列与第四寡核苷酸的第二转座引物结合序列互补，第二衔接序列与第三寡核苷酸的第一转座引物结合序列互补，

第三寡核苷酸自5’端向3’端方向包含第一转座酶识别序列和第一转座引物结合序列，第四寡核苷酸自5’端向3’端方向包含第二转座酶识别序列和第二转座引物结合序列，第一转座引物结合序列是

5’-TCGTCGGCAGCGTC-3’(SEQ ID NO：2)所示序列的反向互补序列，第二转座引物结合序列是5’-GTCTCGTGGGCTCGG-3’(SEQ ID NO：3)所示序列的反向互补序列，

第一寡核苷酸和第二寡核苷酸为单链。

2.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，第一标签序列和/或第二标签序列独立是1-20个连续任意核苷酸。

3.根据权利要求2所述的寡核苷酸对，其中，第一标签序列和/或第二标签序列独立是4-16个连续任意核苷酸。

4.根据权利要求3所述的寡核苷酸对，其中，第一标签序列和/或第二标签序列独立是4、6、8、10、12或16个连续任意核苷酸。

5.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，修饰的单端文库夹板全序列是5’-CAACTCCTTGGCTCACAGAACGACATGGC-3’(SEQ ID NO：11)所示序列。

6.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，修饰的单端文库夹板全序列中的修饰还包含5’端核苷酸缺失或替代。

7.根据权利要求6所述的寡核苷酸对，其中，修饰的单端文库夹板全序列中的修饰包含的5’端核苷酸缺失或替代是1、2、3、4或5个核苷酸的缺失或替代。

8.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，修饰的单端文库夹板全序列中的修饰还包含5’端添加GAAGACAA。

9.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，第一转座酶识别序列和第二转座酶识别序列是5’-CTGTCTCTTATACACATCT-3’(SEQ ID NO：1)所示序列。

10.根据权利要求1所述的寡核苷酸对，其中，第一寡核苷酸为正链，第二寡核苷酸为正链。

11.根据权利要求5所述的寡核苷酸对，其中第一衔接序列与第三寡核苷酸的第一转座引物结合序列互补，第二衔接序列与第四寡核苷酸的第二转座引物结合序列互补。