[发明专利]具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物及其质量检测方法与应用有效
申请号: | 202210487417.X | 申请日: | 2022-05-06 |
公开(公告)号: | CN115068524B | 公开(公告)日: | 2023-10-13 |
发明(设计)人: | 孙东东;康安;李志成;程海波;闫秋莹;李柳;沈卫星;谭佳妮;沈政洁;陈姿含 | 申请(专利权)人: | 南京中医药大学;江苏亚邦中药饮片有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;A61K36/718;A61P35/00 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 陆志斌 |
地址: | 210023 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 肿瘤 活性 黄芩 黄连 提取物 及其 质量 检测 方法 应用 | ||
1.一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物,其特征在于,它是通过以下方法制备得到的:取一定重量比的黄芩和黄连药材,先加适量水浸泡,然后加水提取,合并滤液,浓缩得到。
2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物,其特征在于,它是通过以下方法制备得到的:取重量比为1~4:1~4的黄芩和黄连药材,加适量水浸泡0.5~1小时,然后加5~20倍量水提取1~3次,每次0.5~2小时,合并滤液,浓缩、得到。
3.根据权利要求2所述的具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物,其特征在于,取重量比为1:1的黄芩和黄连药材,加适量水浸泡0.5小时,然后加10倍量水提取2次,每次1小时,合并滤液,浓缩、得到。
4.一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物的质量检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤(1)对照品溶液的制备
分别精密称取盐酸黄连碱、药根碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和白杨素标准品,转移至容量瓶中,加甲醇定容,制成以上化合物的标准品母液;
分别精密量取以上化合物的标准品母液适量,加甲醇配置为含黄连碱:34.99μg/mL、表小檗碱:28.25μg/mL、药根碱:17.945μg/mL、小檗碱:25.798μg/mL、巴马汀:38.988μg/mL、黄芩苷:82.969μg/mL、汉黄芩苷:51.519μg/mL、黄芩素:9.717μg/mL、汉黄芩素:2.0226μg/mL、白杨素:1.6766μg/mL的混合标准品溶液;
步骤(2)供试品溶液的制备
取重量比为1~4:1~4的黄芩和黄连药材,加适量水浸泡0.5~1小时,然后加5~20倍量水提取1~3次,每次0.5~2小时,合并滤液,浓缩,加甲醇溶解,进样之前过微孔滤膜;
步骤(3)线性回归方程的建立
取步骤(1)的混合标准品溶液,依次稀释5倍,通过0.22μm纤维素膜过滤,得到系列浓度的混合对照品溶液,依次注入HPLC,以系列对照品浓度作为横坐标X,对应的峰面积为纵坐标Y,对各化学成分进行线性回归分析并计算线性回归方程;
步骤(4)含量测定
取步骤(2)的黄芩和黄连药对供试品溶液,注入HPLC进行分析,将峰面积代入步骤(3)的线性回归方程,计算供试品溶液中各成分的含量。
5.根据权利要求4所述的质量检测方法,其特征在于,
步骤(1)对照品溶液的制备
分别精密称取盐酸黄连碱、药根碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和白杨素标准品,转移至容量瓶中,加甲醇定容,制成以上化合物的标准品母液;
分别精密量取以上化合物的标准品母液适量,加甲醇配置为含黄连碱:34.99μg/mL、表小檗碱:28.25μg/mL、药根碱:17.945μg/mL、小檗碱:25.798μg/mL、巴马汀:38.988μg/mL、黄芩苷:82.969μg/mL、汉黄芩苷:51.519μg/mL、黄芩素:9.717μg/mL、汉黄芩素:2.0226μg/mL、白杨素:1.6766μg/mL的混合标准品溶液,4℃保存,进样前,过0.22μm微孔滤膜。
6.根据权利要求4所述的质量检测方法,其特征在于,
步骤(2)供试品溶液的制备
取重量比为1:1的黄芩和黄连药材,加适量水浸泡0.5小时,然后加10倍量水提取2次,每次1小时,合并滤液,浓缩,加甲醇溶解,进样之前过微孔滤膜。
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