[发明专利]具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物及其质量检测方法与应用

说明书

本发明公开了一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物及其质量检测方法与应用。本发明根据黄芩和黄连药对中不同成分的结构及其性质特点，通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，洗脱程序、流速，色谱柱等分析条件。经多次实验验证表明，本发明采用HPLC方法能够同时检测10种不同结构的生物碱和黄酮化合物。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确的评价黄芩和黄连药对药材及其提取物与制剂的质量，对控制质量和保证临床疗效具有重要意义。另外本发明通过MTT方法测定黄芩‑黄连提取液对结直肠癌细胞活力具有较好的抑制作用。

技术领域

本发明涉及一种中药技术领域，具体涉及具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物及其质量检测方法与应用。

背景技术

高效液相色谱以液体为流动相，通过高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。中药化学成分复杂多样，如何高效分离识别中药化学成分是中药药效物质基础研究中的一个关键性难题，以往常用的薄层色谱等方法因其精密度、准确度、灵敏度等方面较差，不能满足现代中药研究的需要。高效液相色谱法通过简单的前处理后，将少量的药品上机检测，简单高效、易于操作地对中药成分进行快速准确的分析，目前高效液相已经被广泛应用于生物碱、黄酮、皂苷等各种中药有效成分的测定。

黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根，是中医临床和中成药种最为常用的中药之一，其主要化学成分包括黄酮及其苷类、萜类、挥发油以及多种微量元素。黄连为毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch.)、三角叶黄连(Coptisdeltoidea C.Y.Cheng et Hsiao)或云连(Coptis teeta wall.)的干燥根茎，其主要有效成分为药根碱、巴马汀、小檗碱等生物碱，以及木脂素、黄酮、糖(苷)类等，具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等功效。黄芩-黄连是清热燥湿配伍的经典药对，二者均属苦寒之品，均能清热燥、泻火解毒。根据中医理论黄连偏泻心胃之火；黄芩善清肺、大肠热。黄连和黄连均入手阳明大肠经，两药合用，泄火解毒、清肠止痢功著。临床中被用于结直肠癌治疗，具有良好的疗效。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，经过大量实验筛选，提供一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物及其质量检测方法与应用。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物，它是通过以下方法制备得到的：取一定重量比的黄芩和黄连药材，先加适量水浸泡，然后加水提取，合并滤液，浓缩得到。

作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物，它是通过以下方法制备得到的：取重量比为1～4:1～4的黄芩和黄连药材，加适量水浸泡0.5～1小时，然后加5～20倍量水提取1～3次，每次0.5～2小时，合并滤液，浓缩、得到。

作为优选方案，以上所述的具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物，它是通过以下方法制备得到的：取重量比为1:1的黄芩和黄连药材，加适量水浸泡0.5小时，然后加10倍量水提取2次，每次1小时，合并滤液，浓缩、得到。

一种具有抗肿瘤活性的黄芩和黄连提取物的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)对照品溶液的制备

分别精密称取盐酸黄连碱、药根碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和白杨素标准品，转移至容量瓶中，加甲醇定容，制成以上化合物的标准品母液；